热打击诱导血管内皮细胞释放的外泌体特征及其功能分析

• 作者: 张明 施学智 梁泳欣 童华生 苏磊 陈怀生
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 中暑 人脐静脉内皮细胞 外泌体
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 中暑器官损伤及机制研究专题
• 页码范围: 270-276
• 页数: 7页
• 分类号: R594.12
• 字数: 5329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2020.03.08

摘要

目的 分析热打击诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的外泌体特征及其功能.方法 培养HUVECs并分为对照组与热打击组.热打击组细胞给予41℃热刺激培养2 h,建立热打击细胞模型;对照组细胞于37℃孵育培养2 h.采用纳米颗粒追踪法分析两组细胞释放的外泌体特征;Western blotting检测外泌体标志蛋白CD63和TSG101的表达;荧光标识观察外泌体进入正常细胞的过程.检测、提取外泌体,对细胞进行干预实验,将培养的细胞分为空白对照组(37℃培养HUVECs细胞)、37℃外泌体处理组(加入对照组细胞释放的外泌体)和41℃外泌体处理组(加入热打击组细胞释放的外泌体),采用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况;MTS法检测细胞增殖情况;ELISA法检测凝血功能指标水平;高通量测序法分析外泌体中的微小RNA(miRNA).结果 与对照组不同,41℃热打击组细胞可释放异常外泌体,并导致正常HUVECs出现行为、功能异常,组织因子、血管性血友病因子、纤溶酶原激活物抑制因子1表达明显增加(P<0.05),组织型纤维蛋白溶酶原激活剂表达降低(P<0.05).与37℃孵育HUVECs比较,41℃热打击HUVECs释放的外泌体共出现2590条miRNA调节变化,对细胞凋亡等途径具有较明显影响.结论 41℃热打击可使HUVECs分泌异常外泌体,后者可导致正常细胞出现行为及凝血功能等的异常.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈怀生	深圳市人民医院重症医学科	10	15	2.0	3.0