犬弓首蛔虫TcCPG1的表达及其与几丁质的结合特性

• 作者: 周荣琼 尹莎莎 李芳 江艾耘 陈绍基
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬弓首蛔虫 CPG1 原核表达 几丁质结合
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 356-364
• 页数: 9页
• 分类号: S852.731
• 字数: 6112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.02.017

摘要

为探讨犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)软骨素蛋白多糖TcCPG1的表达特征及其与几丁质的结合方式,为犬弓首蛔虫软骨素蛋白多糖的功能研究提供依据,笔者克隆T.canis软骨素蛋白多糖1基因(Tc-cpg-1)并原核表达重组蛋白TcCPG1,采用镍柱亲和层析技术对重组蛋白进行纯化,并与几丁质进行结合试验;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)进行Tc-c pg-1基因的转录水平的性别和组织差异表达分析.结果 显示:Tc-cpg-1基因编码区(coding sequence,CDS)的长度为1 251 bp,共编码417个氨基酸;SDS-PAGE电泳结果显示重组蛋白TcCPG1以包涵体形式存在,相对分子质量大小约为70 ku;对表达条件进行优化后,以0.8 mmol·L-1 IPTG于16℃诱导14h时可获得大量目的蛋白;利用镍柱亲和层析纯化可以获得具有较高纯度的目的蛋白,与几丁质进行结合试验,验证了重组蛋白TcCPG1能够与几丁质结合;通过qRT-PCR对Tc-cpg-1基因转录水平的组织差异性进行分析,发现Tc-cpg-1在雌虫中高量表达,尤其在雌虫的生殖组织中表达量最高,表明Tc-cpg-1可能参与了T.canis雌虫的生殖过程,推测TcCPG1可能通过与卵壳中几丁质的相互作用从而影响T.canis的胚胎和生殖发育过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周荣琼	西南大学动物科学学院	36	128	7.0	10.0
2	李芳	西南大学动物科学学院	26	121	6.0	10.0
3	陈绍基	西南大学动物科学学院	2	0	0.0	0.0
4	尹莎莎	西南大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0
5	江艾耘	西南大学动物科学学院	6	5	1.0	1.0