PAD4在抗β2GP1/β2GP1复合物促进中性粒细胞胞外诱捕网形成中的作用

• 作者: 孙彬 成思 蔡谦谦 解鸿翔 许国莹 陈永新
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 抗磷脂综合征 抗β2GP1/β2GP1复合物 中性粒细胞胞外诱捕网 肽酰基精氨酸脱亚氨酶4
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 115-121
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20191106-00370

摘要

目的 探讨肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)在抗β2GP1/β2 GP1复合物诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用.方法 分离健康人外周血中性粒细胞与抗β2GP1/β2 GP1复合物(100 μg/ml)共孵育一定时间,Western blot检测细胞PAD4表达;进一步采用PAD4抑制剂Cl-amidine(10μmol/L)预处理中性粒细胞,Western blot检测细胞瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)蛋白质表达,ELISA检测细胞培养上清中髓过氧化物酶(MPO)-DNA相对含量.下腔静脉狭窄法建立APS小鼠血栓模型,并通过腹腔注射Cl-amidine(50 mg/kg)进行干预,Westem blot检测血浆中CitH3蛋白质表达,荧光染色法检测血浆中循环游离DNA(cf-DNA)浓度,取下腔静脉血栓称其重量,观察Cl-amidine能否抑制APS-IgG诱导的NETs和血栓形成.组间差异采用t检验或单因素方差分析.结果 抗β2GP1/β2 GP1复合物能够显著下调细胞质中PAD4蛋白质表达水平[(3.67±0.32) vs (1.47±0.19),t=10.22,P＜0.05],并使细胞核内PAD4蛋白质含量升高[(0.57±0.19) vs (2.97±0.31),t=11.49,P＜0.05];Cl-amidine能显著抑制抗β2 GP1/β2GP1复合物诱导的中性粒细胞CitH3蛋白质表达[(2.46±0.47) vs (0.46±0.13),t=12.24,P＜0.01],明显减少培养上清中MPO-DNA含量[(4.09±0.94) vs (2.80±0.57),t=4.23,P＜0.05].在体内试验中,Cl-amidine能显著抑制APS小鼠血浆中CitH3蛋白质表达[(3.97±0.56) vs (1.09±0.45),t=11.83,P＜0.01],明显降低APS小鼠血浆中cf-DNA浓度[(2 685.0±735.8) vs(1 784.0±577.0),t=3.93,P＜0.05];与对照组EAPS小鼠相比,经Cl-amidine预处理的APS小鼠血栓形成明显减小[(8.22±3.06) vs (4.89±1.90),t=2.27,P＜0.05].结论 PAD4参与了抗β2GP1/β2 GP1复合物诱导的NETs形成,其可能在APS血栓形成中发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许国莹	江苏护理职业学院医学技术学院	12	17	2.0	4.0
2	孙彬	浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院检验中心	3	0	0.0	0.0
3	蔡谦谦	海军军医大学附属长征医院实验诊断科	1	0	0.0	0.0
4	成思	海军军医大学附属长征医院实验诊断科	1	0	0.0	0.0