miR-702-3p对心肌细胞缺氧复氧损伤后凋亡的影响

• 作者: 姜玉玉 宫能静 李小雨 程向阳 高娇娇
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: miR-702-3p 缺血再灌注损伤 线粒体乙醛脱氢酶2 心肌细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 心脏与心血管疾病
• 页码范围: 641-646
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 4154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2020.07.006

摘要

目的 探讨miR-702-3p对心肌细胞缺氧复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)损伤后凋亡的影响.方法 原代培养大鼠心肌细胞,缺氧3 h复氧4 h构建心肌细胞H/R损伤模型.心肌细胞被分为正常对照组(CON)、缺氧复氧+无转染组(H/R)、缺氧复氧+转染miR-702-3p inhibitor NC组(H/R+inhibitor NC)、缺氧复氧+转染miR-702-3p inhibitor组(H/R+inhibi-tor).转染miR-NC和miR-702-3p inhibitor 24 h后,进行后续实验.采用CCK-8实验和流式细胞术测定各组细胞活力和凋亡率.qRT-PCR检测各组心肌细胞中miR-702-3p的表达水平.Western blot检测各组心肌细胞中乙醛脱氢酶2(aldehyde dehy-drogenase 2,ALDH2)、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达水平.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-702-3p与ALDH23'UTR之间的作用关系.结果 与对照组相比,H/R组心肌细胞miR-702-3p表达量显著升高(P<0.05);与H/R组相比,H/R+inhibitor组miR-702-3p表达显著降低(P<0.05).CCK-8实验和流式细胞术检测结果证实,与对照组相比,H/R组心肌细胞活力降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05);与H/R组相比,H/R+inhibitor组细胞活力显著改善(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05).Western blot结果表明,与对照组相比,H/R组Bax/Bcl-2比值升高,cleaved Caspase-3表达升高,ALDH2蛋白表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,H/R+inhibitor组Bax/Bcl-2比值降低,cleaved Caspase-3表达降低,ALDH2蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05).荧光素酶活性检测结果表明,ALDH2是miR-702-3p的靶基因.结论 本实验表明,ALDH2是miR-702-3p的靶基因,抑制miR-702-3p表达上调了ALDH2蛋白水平,降低了H/R处理后心肌细胞凋亡率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程向阳	蚌埠医学院第一附属医院麻醉科	14	59	5.0	7.0
2	宫能静	蚌埠医学院第一附属医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
3	姜玉玉	蚌埠医学院第一附属医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
4	李小雨	蚌埠医学院第一附属医院麻醉科	1	0	0.0	0.0
5	高娇娇	蚌埠医学院第一附属医院麻醉科	1	0	0.0	0.0