人嗅觉黏膜间充质干细胞来源的外泌体促进内皮细胞的血管生成

• 作者: 卓毅 卢明 寻成峰 李文水 段答 葛丽特 金圣榆 陈伟 陈平 黄雁
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 间充质干细胞 嗅黏膜 外泌体 内皮细胞 血管新生
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 103-109
• 页数: 7页
• 分类号: Q2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.12.1333

摘要

外泌体作为是细胞旁分泌的重要介质,在促血管形成方面有重要作用.在我们前期研究中,已经成功从嗅黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)分离、鉴定了其外泌体,然而,OM-MSCs源外泌体对血管生成的影响尚不清楚.本研究旨在探讨OM-MSCs来源外泌体对内皮细胞血管生成能力的影响.采用PKH67荧光标记OM-MSCs源外泌体,与人脑微血管内皮细胞(human brain microvessel endothelial cells,HBMECs)共培养,观察OM-MSCs外泌体能否进入HBMECs.采用CCK-8法、Transwell迁移实验和小管实验,观察OM-MSCs外泌体对HBMECs增殖、迁移及管状结构形成的影响.采用基质胶塞实验及CD31免疫荧光,观察OM-MSCs外泌体在体内对血管生成的影响.上述研究均以等量PBS作为对照.结果 提示,OM-MSCs外泌体可被HBMECs摄取.CCK-8法检测显示,在处理1、2、3、4、5d各时间点,实验组细胞增殖均优于对照组(1.32±0.14 vs.0.98±0.04,1.36±0.14 vs.1.04±0.06,1.75±0.18 vs.1.33±0.11,2.16±0.11 vs.1.50±0.19,2.71±0.11 vs.1.81±0.20,P＜0.01).Transwell实验结果显示,实验组跨膜迁移细胞吸光度值较对照组显著增多(1.12±0.05 vs.0.02±0.02,P＜0.05).在体外小管实验中,从节点、交叉点、网眼数、血管分支数和总长度5个方面,实验组均高于空白对照组(374.33±127.74vs.193.33±44.79,104.56±33.07 vs.54.33±11.65,20.11±11.20 vs.7.56±3.64,81.67±19.07 vs.57.00±13.02,11466.22±2781.03 vs.8544.00±1848.61,P＜0.05);在体内实验中,实验组成血管及CD31阳性率(％)亦显著高于对照组(85.00±5.57 vs.8.00±2.08,P＜0.05).本研究表明:OM-MSCs外泌体可促进HBMECs增殖、迁移及管样结构形成,提示OM-MSCs外泌体可促进血管新生.