高糖条件下高表达ARNO对人肾小球内皮细胞通透性的影响及其作用机制

• 作者: 唐璐瑶 官涛 李艺 王小龙 胡成芳 黄云剑
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ARNO Arf6 高糖 人肾小球内皮细胞 通透性
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 55-61
• 页数: 7页
• 分类号: R692.6
• 字数: 5746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2020.01.05

摘要

目的 探讨高糖条件下高表达ARNO对人肾小球内皮细胞(HRGEC)通透性的影响及其作用机制.方法 体外培养HRGEC,分别观察不同时间梯度(15、30、45和60 min)和浓度梯度(10、20、30和40 mmol/L)高糖作用对ARNO蛋白表达和内皮细胞通透性的影响.分别采用ARNO siRNA和Arf6 siRNA重组慢病毒载体感染HRGEC,获得沉默ARNO和Arf6的HRGEC细胞株,观察ARNO和Arf6基因沉默对内皮细胞通透性的影响.结果 时间梯度实验中,与高糖对照组相比,高糖15、30、45、60 min组HRGEC ARNO表达明显升高(分别为0.670±0.051、0.960±0.106、0.716±0.026、0.531±0.030 vs . 0.242±0.029),差异有统计学意义( P<0.05),与高糖15 min组相比,高糖30 min组ARNO表达升高(P<0.05),与高糖30 min组相比,高糖45 min组ARNO表达回落(P<0.05),与高糖45 min组相比,高糖60 min组ARNO表达降低(P<0.05).与高糖对照组相比,高糖15、30、45、60 min组内皮细胞通透性明显增加(分别为1.196±0.004、1.399±0.012、1.301±0.052、1.184±0.030 vs . 1.000),差异有统计学意义( P<0.05),与高糖15 min组相比,高糖30 min组通透性增加(P<0.05),与高糖30 min组相比,高糖45 min组通透性下降(P<0.05),与高糖45 min组相比,高糖60 min组通透性下降(P<0.05).浓度梯度实验中,与正常糖组相比,高糖20、30、40 mmol/L组HRGEC ARNO表达明显升高(分别为0.632±0.031、0.927±0.041、1.183±0.098 vs . 0.169±0.033),差异有统计学意义( P<0.05),且随高糖浓度增加,ARNO表达呈递增趋势,差异均有统计学意义(P<0.05).与正常糖组相比,高糖10、20、30、40 mmol/L组内皮细胞通透性明显增加(分别为1.147±0.015、1.237±0.023、1.351±0.015、1.444±0.019 vs . 1.000),差异有统计学意义(P<0.05),且随高糖浓度增加,内皮细胞通透性呈递增趋势,差异均有统计学意义(P<0.05).转染慢病毒后,与正常糖未转染组及正常糖空载体组相比,正常糖ARNO siRNA组ARNO mRNA转录明显降低(0.255±0.056 vs. 1.000、1.183±0.297),ARNO蛋白表达明显降低(0.088±0.005 vs. 0.246±0.011、0.237±0.009);正常糖Arf6 siRNA组Arf6 mRNA转录明显降低(0.314±0.090 vs. 1.000、1.140±0.236),Arf6蛋白表达明显降低(0.690±0.012 vs. 0.917±0.009、0.919±0.009),差异均有统计学意义(P<0.05).沉默内皮ARNO后,与高糖未转染组及高糖空载体组相比,高糖ARNO siRNA组ARNO蛋白表达明显降低(0.572±0.021 vs. 0.915±0.005、0.916±0.012),Arf6活性明显降低(0.263±0.007 vs. 0.484±0.014、0.490±0.008),细胞通透性也明显降低(0.718±0.017 vs . 1.000、0.978±0.040),差异均有统计学意义(P<0.05).此外,沉默内皮Arf6后,与高糖未转染组及高糖空载体组相比,高糖Arf6 siRNA组Arf6蛋白表达明显降低(0.673±0.015 vs . 0.932±0.020、0.899±0.022),内皮细胞通透性也明显降低(0.768±0.050 vs . 1.000、0.978±0.040),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 高糖诱导的HRGEC高通透性与ARNO/Arf6信号活化有关,抑制ARNO的表达及Arf6活性可抑制糖尿病肾病肾小球内皮的高通透性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小龙	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
2	胡成芳	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
3	唐璐瑶	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	1	0	0.0	0.0
4	李艺	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	3	6	2.0	2.0
5	官涛	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	2	2	1.0	1.0
6	黄云剑	陆军军医大学附属新桥医院肾内科	2	2	1.0	1.0