转录因子KLF7对IL-6基因的转录调控分析

• 作者: 娄明 娄钰琦 尤欣 徐海冬 李辉 王宁 闫晓红
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鼠 KLF7 IL-6 启动子 转录调控
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 45-55
• 页数: 11页
• 分类号: S831.2
• 语种: 中文

摘要

选取小鼠IL-6基因转录起始位点上游2 000 bp序列作为启动子序列,采用在线生物信息学软件分析转录因子结合位点;利用PCR扩增小鼠IL-6基因启动子及其5'端截短突变体片段,构建相应的荧光素酶报告基因重组质粒,转染3T3-L1细胞后检测报告基因活性;采用共转染分析转录因子KLF7对IL-6基因启动子活性的影响;利用siRNA技术探究敲低KLF7对细胞内源性IL-6基因表达的影响.生物信息学分析显示,小鼠IL-6基因启动子区存在5个Sp1/KLFs结合位点;报告基因分析和定点突变分析发现,KLF7通过IL-6基因启动子区-98至-89 bp处(CCCCACCCAC)发挥调控IL-6基因启动子活性的作用;Real-timeRT-PCR和Western blot分析显示,敲低KLF7抑制细胞内源性IL-6基因表达.文章首次发现KLF7直接调控IL-6基因表达,研究结果对揭示KLF7在脂肪生成中的作用机制具有重要意义.