目的 研究靶向沉默ANXA3对大鼠吗啡镇痛效能的作用及其可能机制.方法 雄性SD大鼠连续7 d鞘内注射15 μg吗啡建立慢性吗啡镇痛耐受模型.将30只大鼠随机分为吗啡组、阴性对照组和ANXA3 siRNA组.实验第1、3、5和7天,通过测定各组大鼠后爪的热缩足反射潜伏期(PWL)计算最大可能镇痛效应百分数(%MPE).第7天行为学测试结束后麻醉并处死大鼠,收集各组大鼠脊髓腰膨大,采用Western blotting及RT-PCR测定ANXA3 mRNA及蛋白表达水平.采用RT-PCR和ELISA试剂盒测定肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的mRNA及蛋白表达水平.采用Western blotting评价细胞外信号调节激酶(ERK)和c-Jun氨基端激酶( JNK)的磷酸化水平.结果 注射吗啡后,阴性对照组%MPE与吗啡组比较无明显差异.注射吗啡第3、5、7天,ANXA3 siRNA组%MPE均明显高于阴性对照组(78.27%±8.50% vs . 71.75%±5.98%、64.37%±25.94% vs . 43.56%±2.69%、39.96%±3.27% vs . 13.81%±1.25%,P<0.05).与吗啡组比较,阴性对照组ANXA3 mRNA和蛋白相对表达水平无明显差异.ANXA3 siRNA组的ANXA3 mRNA和蛋白相对表达水平均低于阴性对照组(0.47±0.09 vs. 1.14±0.08、0.38±0.05 vs. 1.15±0.21, P<0.05).与吗啡组比较,阴性对照组TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白浓度无明显差异.ANXA3 siRNA组的TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白浓度均低于阴性对照组[(210.15±19.86) pg/g vs. (394.93±54.18) pg/g、(313.42±42.19) pg/g vs. (534.26±49.78) pg/g、(434.68±49.15) pg/g vs. (794.92±98.32) pg/g,P<0.05].与吗啡组比较,阴性对照组p-ERK和p-JNK蛋白相对表达水平无明显差异.ANXA3 siRNA组p-ERK和p-JNK蛋白相对表达水平明显均低于阴性对照组(0.55±0.04 vs. 1.07±0.12、0.68±0.07 vs. 1.15±0.04,P<0.05).结论 靶向沉默ANXA3可能通过调控ERK和JNK的磷酸化水平增强吗啡的镇痛效能并减轻炎症反应.