利用荧光蛋白示踪脑微血管内皮细胞微丝的动态变化

• 作者: 杜书嵩 赵伟东
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Lifeact 肌动蛋白 脑微血管内皮细胞 活细胞显微成像术
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 673-678
• 页数: 6页
• 分类号: R33
• 字数: 4473字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12007/j.issn.0258-4646.2020.08.001

摘要

目的 利用活细胞显微成像术对脑微血管内皮细胞内肌动蛋白的动态变化实现实时观察.方法 构建绿色荧光蛋白(GFP)标记Lifeact的真核表达载体即Lifeact-pEGFP,利用脂质体转染法将Lifeact-pEGFP质粒转染至脑微血管内皮细胞中,利用共聚焦激光扫描显微镜对Lifeact-pEGFP在细胞内的分布进行分析,并检测其在细胞伸展和迁移过程中的动态变化.结果 成功将Lifeact-pEGFP质粒转染至人脑微血管内皮细胞,细胞存活未受到影响.Lifeact-pEGFP能将活细胞中的肌动蛋白丝标记为绿色荧光,并能够有效监测细胞伸展和迁移过程中肌动蛋白丝的动态变化.结论 Lifeact-pEGFP转染结合活细胞显微成像术可以用于实时记录和分析脑微血管内皮细胞内肌动蛋白丝的动态变化.