GC-MS分析慢性氨气应激对肉鸡血清代谢物的影响

• 作者: 孙永波 张宏福 王亚 萨仁娜
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 肉鸡 代谢组学 血清 代谢物 气相色谱/质谱联用技术
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1688-1698
• 页数: 11页
• 字数: 8256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2020.08.017

摘要

[目的]随着养殖业集约化和规模化的发展,舍内环境对畜禽生长的影响日益突出.在密闭舍饲条件下,不断产生有毒有害气体,其中氨气的危害最大,降低畜禽生产性能,威胁动物健康.为此开展慢性氨气应激对肉鸡血清代谢物影响的研究,从小分子物质和代谢途径方面探究氨气导致机体代谢发生的变化,为舍内氨气的合理调控提供数据支持.[方法]试验采用单因素完全随机设计,将96只21日龄健康AA肉鸡随机分成对照组和试验组,每组设4个重复,每个重复12只鸡.对照组氨气浓度为0 mg·kg-1,试验组氨气浓度为45 mg·kg-1.试验在人工模拟呼吸舱内进行,呼吸舱采用全自动化控制温湿度等养殖条件,采用网上平养,自由采食和饮水,24h光照,试验期为21d.在肉鸡42日龄时,从每个重复中随机抽取2只,翅静脉采血,分离血清.将血清样品预处理后,采用气相色谱/质谱联用技术(gas chromatograph tandem mass spectrometer technology,GC-MS)检测代谢产物,利用质谱数据库对其进行鉴定.通过主成分分析、偏最小二乘法判别分析、正交偏最小二乘法判别分析、t-检验等,寻找差异代谢物,并利用生物信息学方法对差异代谢物进行通路富集分析.[结果](1)利用GC-MS方法,结合质谱数据库对检测到的代谢物进行快速鉴定,在肉鸡血清中共检测到204种代谢物.将代谢组数据导入SIMCA-P软件进行多元统计分析,结合t-检验筛选出23种差异代谢物,其中上调19个,下调4个.(2)差异代谢物主要涉及能量代谢(乳酸、α-酮戊二酸)、氨基酸代谢(L-别苏氨酸、L-高丝氨酸、烟酰甘氨酸)、脂肪酸代谢(硬脂酸、亚麻酸、亚油酸、胆固醇)以及核苷酸代谢(次黄嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶)等.(3)代谢通路富集分析表明,氨气应激主要影响了肉鸡血清的脂肪代谢通路,如亚油酸代谢、花生四烯酸代谢以及α-亚麻酸代谢.[结论]GC-MS较为全面地检测到血清的代谢物,能够准确地筛选出差异代谢物,同时慢性氨气应激显著影响肉鸡的血清代谢物含量,主要影响脂肪代谢通路,为阐明氨气应激影响营养代谢的机制提供参考.