摘要:
为揭示小麦促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径组分基因介导植物抵御低磷逆境的功能,以TaMAP-KK3为对象,利用生物信息学技术分析其分子特征;通过设置低磷处理,检测小麦中TaMAPKK3基因的表达模式;将供试基因融合至双元表达载体pCAMBIA3301启动子下游,利用农杆菌介导法遗传转化烟草,通过qRT-PCR筛选出超表达TaMAPKK3基因的烟草植株;以转基因烟草为试验材料,通过测定低磷条件下植株的生长状态、光合参数以及含磷量等,鉴定TaMAPKK3介导植株抵御低磷逆境的功能.结果表明,TaMAPKK3编码阅读框1572 bp,编码523个氨基酸残基,蛋白分子量58.508 ku,等电点为5.72.编码蛋白含有典型MAPKKs家族蛋白结构域,在其C端含有核转移因子结构域(NTF2),归属于MAPKKs家族中的B亚组;系统进化分析显示,TaMAPKK3与乌拉尔图小麦TuMAP-KK6具有相似的进化途径;与正常供磷相比,低磷处理下,TaMAPKK3表达量随处理时间的延长呈现上调表达趋势,且在处理27 h转录丰度最高,进行复磷处理后供试基因转录本减少,在复磷处理27 h后转录丰度恢复初始状态;低磷处理下,超表达TaMAPKK3烟草株系较野生型长势增强,植株鲜质量和干物质积累量显著提高,植株根系发育较好,光合功能得到改善,磷素累积量显著增多.综上,TaMAPKK3在转录水平上对低磷逆境产生应答,过表达该基因增强植株抵御低磷胁迫的能力.