miR-155-5p靶向SEP15基因在H2O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤中的作用

• 作者: 张虹 陈圣文 陈颖平
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人晶状体上皮细胞 HLE-B3 miR-155-5p SEP15 细胞损伤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 425-429
• 页数: 5页
• 分类号: R776
• 字数: 4912字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-155-5p靶向SEP15基因对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及潜在机制.方法 用含100μmol·L-1 H2O2的培养液培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3建立H2 O2损伤模型,根据处理和转染情况分为对照组、H2 O2组、H2 O2+anti-miR-NC组、H2 O2+anti-miR-155-5p组、H2 O2+pcDNA组、H2 O2+pcDNA-SEP15组、miR-NC组、miR-155-5p组、H2 O2+anti-miR-155-5p+si-NC组、H2 O2+anti-miR-155-5p+si-SEP15组,Real-time PCR检测HLE-B3细胞中miR-155-5p和SEP15 mRNA的表达,Western blot测定SEP15、Bcl-2、Bax和Cleaved-caspase-3蛋白的表达,ELISA测定H2 O2诱导后HLE-B3中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平,流式细胞术测定细胞凋亡率,Targetscan预测miR-155-5p与SEP15的结合关系,双荧光素酶检测验证miR-155-5p与SEP15的调控关系.结果 H2O2组HLE-B3细胞中miR-155-5p、SEP15 mRNA、SEP15蛋白、MDA、SOD、GSH-Px含量及凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05).H2 O2+anti-miR-155-5p组和H2 O2+anti-pcDNA-SEP15组的细胞凋亡率分别为(12.69±1.28)％和(14.67±1.52)％,分别与H2O2+anti-miR-NC组的(25.68±2.34)％和H2 O2+pcDNA组的(23.65±2.17)％相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05).Targetscan预测miR-155-5p与SEP15存在结合位点,双荧光素酶检测结果显示,miR-155-5p组野生型WT-SEP-15的萤火虫荧光素酶相对活性为0.39±0.03,较miR-NC组的1.02±0.09显著降低(P=0.000).与H2O2+anti-miR-155-5p-si-NC组相比,H2O2+anti-miR-155-5p+si-SEP15组的SEP-15蛋白、Bcl-2蛋白、SOD活性和GSP-Px含量均显著降低,Bax蛋白、MDA含量及细胞凋亡率均显著升高(均为P<0.05).结论 miR-155-5p通过靶向SEP15基因以减轻H2 O2对人晶状体上皮细胞HLE-B3的损伤并抑制细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张虹	海南医学院第二附属医院眼科	5	0	0.0	0.0
2	陈圣文	海南医学院第二附属医院眼科	8	12	2.0	3.0
3	陈颖平	海南医学院第二附属医院眼科	4	0	0.0	0.0