抗人抗苗勒管激素N端439～451表位单克隆抗体的制备及其性能研究

• 作者: 别明江 叶诗洋 周永君 孙纪奎 杨子霄 王保宁 陈寒雪
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 抗苗勒管激素 表位单抗 性能
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 494-498
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.12182/20200760102

摘要

目的 制备抗人抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)N端特定表位肽的特异单克隆抗体并对其特性进行鉴定.方法 利用生物信息分析软件预测AMH特定多肽片段,合成AMH成熟N端区域的4个抗原性好的表位肽段作为筛选靶抗原.用重组AMH蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP/20细胞进行细胞融合,通过杂交瘤技术制备抗AMH单克隆抗体,用N端4个表位肽(表位1:439～451 RGRDPRGPGRAQR,表位2:273-285 PPRPSAELEESPP,表位3:42～54 DLDWPPGSPQEPL,表位4:494～506 WPQSDRNPRYGNH)分别作抗原,间接ELISA和Western blot对筛选获得的特异抗表位单抗的抗原结合特性进行鉴定.结果 筛选到两株能够稳定分泌抗人AMH表位1(anti-AMH-1)和表位2(anti-AMH-2)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其分泌的单抗分别命名为anti-AMH-1和anti-AMH-2.该2株单抗细胞表达纯化后,检测其抗体效价分别为1:12000和1:1600.Western blot确认两种单抗除效价有差异外,识别抗原也有差异,anti-AMH-1不但能识别AMH的N端439-451表位肽,而且能识别重组AMH的氨基酸序列(rAMH),也能识别卵巢组织.anti-AMH-2能识别rAMH和卵巢组织.结论 成功构建了抗人AMH N端的特异表位的2种单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙纪奎	四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
2	王保宁	四川大学华西基础医学与法医学院病原生物系	14	34	3.0	4.0
3	陈寒雪	四川大学华西基础医学与法医学院病原生物系	1	0	0.0	0.0
4	杨子霄	川北医学院临床医学院微生物教研室	1	0	0.0	0.0
5	叶诗洋		1	0	0.0	0.0
6	周永君	四川大学华西基础医学与法医学院病原生物系	2	3	1.0	1.0