基于密度梯度法分离纯化的改良培养新生小鼠心肌细胞方法研究

• 作者: 刘旖 曾晓聪 熊劲节
• 来源期刊: 内科
• 学科: 医学
• 关键词: 原代心肌细胞培养 Percoll密度梯度法 新生小鼠
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 121-126
• 页数: 6页
• 分类号: R33
• 字数: 5314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16121/j.cnki.cn45-1347/r.2020.02.01

摘要

目的 基于Percoll不连续密度梯度法分离纯化心肌细胞,建立一个快速稳定提取新生小鼠心肌细胞的原代培养方法.方法 在无菌状态下取C57BL/6乳鼠心室,用低浓度Ⅱ型胶原酶消化,通过调整温度、消化方式、离心时间及转速,采用Percoll密度梯度法分离纯化心肌细胞.观察不同时间心肌细胞形态;用0.4％台盼蓝染色检测细胞存活率及细胞数量;采用免疫荧光染色法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)表达情况,鉴定心肌细胞及其纯度.结果 5次培养结果显示,心肌细胞的平均存活率为(93.12±0.75)％,纯度为(96.36±0.60)％,细胞生长状态良好,可以贴壁自发搏动.结论 采用本方法能获得产量、存活率及纯度很高的新生小鼠原代心肌细胞,耗时较短,是一种理想的分离纯化原代心肌细胞的方法,可满足后续各种实验要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾晓聪	广西医科大学第一附属医院心血管内科	16	51	4.0	6.0
2	熊劲节	广西医科大学第一附属医院心血管内科	3	7	2.0	2.0
3	刘旖	广西医科大学第一附属医院心血管内科	1	0	0.0	0.0