油茶ABI5基因的克隆及其表达分析

• 作者: 余姝姝 刘懿瑶 卢梦琪 周俊琴 杨进 谭晓风
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 油茶 自交不亲和 ABI5基因 原核表达 亚细胞定位 表达模式
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1583-1592
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13592/j.cnki.ppj.2019.0612

摘要

以油茶(Camellia oleifera)主栽品种'华硕'为试验材料,通过RT-RCR的方法克隆出油茶脱落酸不敏感蛋白5 (abscisic acid-insensitive 5,ABI5)全长cDNA序列,命名为CoABI5,利用不同的在线网站对CoABI5基因进行生物信息学分析,通过原核表达、亚细胞定位和实时荧光定量PCR分别对该基因的表达情况、表达部位和表达模式进行研究分析.结果 表明:该序列CDS长度为795 bp,编码264个氨基酸,其中与茶树(Camellia sinensis)的ABI5相似性最高,达到97.73％.原核表达实验发现融合蛋白pCold-CoABI5-TF在37℃诱导4h后,在85 kDa处出现一条蛋白条带,与理论融合蛋白的分子量一致.亚细胞定位显示该基因定位于细胞核.实时荧光定量PCR结果表明,CoABI5基因在油茶花粉中的表达量最高,自交24 h花柱中的表达量大于'华硕'×'华鑫'异交,异交48 h子房中的表达量大于自交.本研究对进一步挖掘该基因在油茶后期自交不亲和过程中发挥的作用提供研究基础,对油茶自交不亲和分子机制解析具有重要的意义.