miR-29对GnRH基因启动子区特定位点甲基化的影响研究

• 作者: 周宇荀 李凯 李晓宁 王欣 肖君华 陈佳贤 陈贞
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: miR-29 GnRH基因 DNA甲基化 二代测序
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.012

摘要

检测GT1-7细胞中miR-29对GnRH启动子区域甲基化的影响,探究GnRH特定位点的甲基化与其表达量的相关性.采用重亚硫酸盐测序(BSP)结合二代测序技术(NGS)的方法检测GT1-7及miR-29敲除的GT1-7(miR-29KO-GT1-7)细胞中GnRH启动子区7个CpG位点的甲基化程度.根据测序结果,利用CRISPR-dCas9技术在差异显著的CpG6位点特异性富集Dnmt3a、Tet1,并通过二代测序检测该位点甲基化变化,同时利用实时荧光定量PCR技术检测GnRH的表达量,验证二者之间的相关性.结果显示:在miR-29KO-GT1-7细胞中,与对照组相比,在CpG6位点富集Dnmt3a后其甲基化水平上升17％,GnRH的表达水平下降40％(P<0.01);在GT1-7细胞中,CpG6位点富集Tet1,可使其甲基化水平下降20％,GnRH的表达水平上升50％(P<0.05).结果表明miR-29可通过影响GnRH启动子DNA甲基化水平尤其是特定CpG位点的甲基化程度调控GnRH的表达,为进一步研究解析性发育的调控提供了新的表观遗传机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖君华		58	137	7.0	9.0
2	李凯		58	122	6.0	9.0
3	周宇荀		53	102	6.0	9.0
4	王欣		12	33	3.0	5.0
5	李晓宁		7	4	1.0	1.0
6	陈佳贤		1	0	0.0	0.0
7	陈贞		1	0	0.0	0.0