基于FOXM1启动子示踪体系对MDA-MB-231细胞亚群的分选与鉴定

• 作者: 向勤 李子青 汪运超 谭拥军
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 启动子示踪 慢病毒载体 FOXM1 乳腺癌细胞MDA-MB-231
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 28-32
• 页数: 5页
• 分类号: R329.23
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.028

摘要

为实现细胞内FOXM1表达的可视化,采用基因工程的方法构建慢病毒载体(Lv-PromoterFOXM1-GFP).该慢病毒载体携带1.2 kb的FOXM1启动子区域和绿色荧光蛋白(GFP)基因.将Lv-PromoterFOXM1-GFP与辅助质粒共转染HEK293T细胞,包装慢病毒并感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞.以未感染病毒的MDA-MB-231细胞样品作为阴性对照,经流式细胞仪分析,发现实验组GFP阳性细胞数升高,证明慢病毒感染成功.以GFP的表达为标准,将Lv-PromoterFOXM1-GFP感染的MDA-MB-231细胞通过流式分选,获得GFP-High细胞亚群和GFP-Low细胞亚群.通过Western Blot证实根据GFP所分选出的两组细胞亚群的FOXM1表达量有显著差别,且GFP水平可以对应细胞内的内源FOXM1表达水平.因此在癌细胞中以FOXM1表达水平的高低分离出癌细胞亚群,为研究FOXM1在乳腺癌发生发展中的功能提供了研究材料,也对进一步研究FOXM1的生物学特性以及靶向肿瘤诊断与治疗具有十分重要的意义.