红色荧光蛋白mCherry在衣原体感染模型中的应用

• 作者: 刘珊珊 张婧 张宏波 彭亮 胡紫昊 赵宇婕 陈建林
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 红色荧光蛋白 mCherry 衣原体 基因表达
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 950-957
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20200818-00407

摘要

目的:建立红色荧光蛋白mCherry在衣原体中稳定表达的方法，并使用荧光菌株Cm-mCherry构建有效的衣原体感染模型。方法:构建含有红色荧光蛋白mCherry的重组质粒pmCherry：：CM，利用氯化钙法将pmCherry：：CM转化至衣原体质粒缺失株CMUT中，经过筛选与纯化得到荧光菌株Cm-mCherry。Cm-mCherry感染HeLa229细胞后观察包涵体中红色荧光的发光情况，并与间接免疫荧光染色法比较，评估细胞感染模型构建是否成功；Cm-mCherry感染小鼠后，通过测定下生殖道载菌量、冷冻切片观察上生殖道衣原体红色荧光、分离生殖道评价输卵管积水发病情况，确定Cm-mCherry的感染力、侵袭力与致病性，评估动物感染模型构建是否成功。结果:红色荧光蛋白mCherry在转化株Cm-mCherry中稳定表达，红色荧光蛋白标记法与间接免疫荧光染色法一致度高；Cm-mCherry小鼠感染模型中，感染率为100%(10/10)，下生殖道载菌量可稳定保持高水平，在上生殖道冷冻切片中可观察到带有红色荧光的包涵体，输卵管积水发病程度与Cm野生株差异无统计学意义( P>0.05)，证实Cm-mCherry有较好的感染力、侵袭力与致病性。 结论:成功建立红色荧光蛋白mCherry在衣原体中稳定表达的方法，转化后的荧光菌株Cm-mCherry有较好的感染力、侵袭力与致病性，可用于衣原体细胞、动物感染模型的构建，为研究衣原体感染机制提供良好的实验工具。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭亮		10	43	3.0	6.0
2	陈建林		35	144	7.0	11.0
3	张宏波		16	46	4.0	6.0
4	刘珊珊		4	62	2.0	4.0
5	张婧		13	67	5.0	8.0
6	胡紫昊		2	0	0.0	0.0
7	赵宇婕		2	0	0.0	0.0