过表达miR-140-5p的人脐带间充质干细胞对骨关节炎的治疗作用

• 作者: 井文森 彭侃 王波 胡守业 鲁超
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨关节炎 人脐带间充质干细胞 miR-140-5p 重组慢病毒 软骨损伤
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 825-833
• 页数: 9页
• 分类号: R684.3
• 字数: 5994字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2020.08.015

摘要

目的 探究过表达miR-140-5p的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对骨关节炎的治疗作用.方法 从正常足月剖宫产健康新生儿脐带标本中分离和培养hUC-MSC.用过表达miR-140-5p的重组慢病毒载体pLenO-DCE-Puro-miR-140-5p或空慢病毒载体转染293T细胞,收集重组慢病毒悬液.将hUC-MSC分为感染组(过表达miR-140-5p组)、空病毒组和对照组,分别应用相应的慢病毒悬液处理感染组和空病毒组hUC-MSC,MTT法测定hUC-MSC增殖能力.将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)、空病毒组(n=15)和过表达miR-140-5p的重组慢病毒组(miR-140-5p组,n=15).通过切断大鼠右膝关节的前交叉韧带建立骨关节炎模型.空病毒组和miR-140-5p组大鼠分别关节腔内注射50μl空病毒或过表达miR-140-5p的重组慢病毒感染的hUC-MSC(1×106个细胞),假手术组和模型组大鼠注射等体积PBS,共给药8周,每周注射3次.番红O-固绿染色和OARSI评分考察软骨退变情况.RT-PCR或Western blot检测大鼠软骨组织中miR-140-5p、SOX9、collagenⅡ、Aggrecan、NLRP3、caspase-1、MMP13和ADAMTS-5的表达.结果 感染组、空病毒组和对照组的细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05).与模型组相比,miR-140-5p组大鼠的番红O染色明显加深.miR-140-5p组的OARSI评分均显著低于模型组(P<0.05).miR-140-5p组collagenⅡ(COL2A1)、Aggrecan和SOX9的表达水平均显著高于模型组(P<0.05).miR-140-5p组NLRP3、caspase-1、MMP13和ADAMTS-5的mRNA和蛋白表达水平均显著低于模型组(P<0.05).结论 通过关节腔内注射过表达miR-140-5p的hUC-MSC可显著抑制骨关节炎大鼠的软骨退变并提高软骨修复功能.