多聚甲醛固定对流式细胞术检测人外周血淋巴细胞亚群的影响

• 作者: 侯俊 冯帆 孙慧伟 屈蒙蒙 杨锐创 柴燕涛 毕京峰 王志杰 胡燕 邢小燕 高鸿雁
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流式细胞术 多聚甲醛 淋巴细胞亚群 平均荧光强度
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 729-733
• 页数: 5页
• 分类号: R446
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2020.10.02

摘要

目的 考察多聚甲醛(PFA)浓度和固定时间对流式细胞术检测人外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比和平均荧光强度的影响.方法 以健康人外周血为研究对象,将六色荧光抗体标记后溶血处理的细胞分别用PBS、1％PFA(10 g/L)和4％PFA(40 g/L)进行重悬或固定,用流式细胞仪在固定0、4、8、12、24、48和72 h后检测CD19-CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、CD3-CD19+B、CD3-CD56+NK细胞占淋巴细胞百分比,及CD45、CD3、CD4、CD8、CD19、CD56的平均荧光强度.结果 与PBS对照组相比,72 h内,PFA浓度及固定时间对外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比均没有影响(P均>0.05);固定8 h内,PBS对各淋巴细胞亚群平均荧光强度均无影响,1％PFA组CD4平均荧光强度下降,4％PFA组CD45、CD3、CD4、CD8平均荧光强度均下降;固定24 h后,各淋巴细胞亚群平均荧光强度均下降,同时4％PFA固定后平均荧光强度均低于1％PFA(P<0.05).结论 使用流式细胞术检测人外周血淋巴细胞亚群,细胞染色后若8 h内检测用PBS进行细胞重悬检测效果最好,PFA固定不应超过12 h,1％PFA固定效果优于4％PFA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡燕	中国医学科学院药用植物研究所	13	16	2.0	3.0
2	邢小燕	中国医学科学院药用植物研究所	4	35	2.0	4.0
3	冯帆	中国医学科学院药用植物研究所	3	4	1.0	2.0
4	杨锐创	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
5	屈蒙蒙	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
6	毕京峰	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
7	高鸿雁	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
8	柴燕涛	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
9	孙慧伟	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0
10	王志杰	中国医学科学院药用植物研究所	4	0	0.0	0.0
11	侯俊	中国医学科学院药用植物研究所	1	0	0.0	0.0