LncRNA-ATB通过调节miR-200c表达对肾移植大鼠急性排斥反应的影响

• 作者: 乔良伟 曲青山 李明
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 被转化生长因子β活化的长链非编码RNA 微小RNA 肾移植 急性排斥反应 炎症反应 大鼠,Wistar
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 955-962
• 页数: 8页
• 分类号: R692.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200510

摘要

目的:探讨被转化生长因子β活化的长链非编码RNA(LncRNA-ATB)调节微小RNA(miRNA)-200c对肾移植大鼠移植后急性排斥反应(AR)和受体组织炎症反应的影响,分析肾移植AR潜在的分子机制,为临床诊断和治疗AR提供理论参考.方法:30只SD大鼠为供体,30只Wistar大鼠为受体,通过手术将供体肾脏移植到受体大鼠体内,建立肾移植AR模型,将建模成功大鼠(27只)随机分为模型组、LncRNA-ATB短发夹RNA(shRNA)组和LncRNA-ATB-NC组,每组9只.选取10只Wistar大鼠为假手术组.术后2 h,LncRNA-ATB-shRNA组和LncRNA-ATB-NC组大鼠按每只200μL分别尾静脉注射含LncRNA-ATB-shRNA和LncRNA-ATB-NC的psiCHECK2基因重组质粒脂质体复合物,假手术组和模型组大鼠按每只200μL尾静脉注射Opti-MEM培养基.干预7 d后,RT-PCR法检测各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肾组织病理形态表现并对AR进行诊断分级和半定量评分,RT-PCR法和Western blotting法检测各组大鼠肾组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核转录因子κB(NF-κB)mRNA及蛋白表达水平.结果:HE染色,与假手术组比较,模型组大鼠肾脏出现AR,表现为炎性细胞浸润、动脉炎症、间质细胞水肿和皮质出血等,LncRNA-ATB-NC组与模型组大鼠肾脏组织病理形态表现相似,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织病理学形态表现较模型组和LncRNA-ATB-NC组均减轻.与假手术组比较,模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05),外周血中miR-200c表达水平均降低(P<0.05);与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05),外周血中miR-200c表达水平升高(P<0.05);模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论:沉默LncRNA-ATB可以减轻肾移植大鼠移植后AR,抑制受体组织发生炎症反应,其机制可能是通过上调miR-200c,抑制TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达而发挥炎症抑制作用.