SP-1通过miR-135b/HIF-1α轴对缺氧诱导 心肌细胞损伤的影响

• 作者: 孟庆雯 杨洋 杨珊珊 魏俊萍 黄珊
• 来源期刊: 中国药业
• 学科: 医学
• 关键词: 特异性蛋白1 心肌细胞损伤 miR-135b HIF-1α 缺氧
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 25-31
• 页数: 7页
• 分类号: R965|R972
• 字数: 4796字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-4931.2020.13.007

摘要

目的 探讨特异性蛋白1(SP-1)通过miR-135b/HIF-1α轴对缺氧诱导的心肌细胞损伤的作用.方法 H9c2细胞进行缺氧处理后,转染si-SP-1,miR-135b mimic,anti-miR-135b和CoCl2(HIF-1α激活剂).采用蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测细胞SP-1和HIF-1α蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测miR-135b表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧簇(ROS)含量,酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量,生物信息学软件分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-135b与HIF-1α间的靶向结合作用.结果 缺氧后,H9c2细胞内SP-1蛋白表达呈时间依赖性显著升高(P<0.05),miR-135b表达呈时间依赖性显著降低(P<0.05).与对照组(A组)相比,缺氧组(B组)H9c2细胞中SP-1和HIF-1α蛋白表达分别为1.467±0.055,1.437±0.082(P=0.014,0.017),细胞凋亡率[(14.591±1.863)％,P=0.000]、细胞上清液中TNF-α[(5.270±0.359)pg/mL,P=0.012]、IL-1β[(25.060±1.212)pg/mL,P=0.000]、IL-6[(82.707±4.550)pg/mL,P=0.000]和ROS(1.239±0.075,P=0.021)含量均显著升高(P<0.05),miR-135b表达(0.466±0.071,P=0.001)和细胞增殖能力[(67.242±3.490)％,P=0.008]均显著降低(P<0.05);与缺氧+siRNA组(C组)相比,缺氧+si-SP-1组(D组)H9c2细胞中SP-1(0.238±0.039,P=0.001)和HIF-1α的蛋白表达(1.126±0.100,P=0.032)、细胞凋亡率[(4.668±0.731)％,P=0.000]、细胞上清液中TNF-α[(3.901±0.354)pg/mL,P=0.022]、IL-1β[(17.198±1.216)pg/mL,P=0.002]、IL-6[(56.742±4.081)pg/mL,P=0.017]和ROS(1.086±0.090,P=0.028)含量均显著降低,miR-135b表达(0.752±0.094,P=0.015)和细胞增殖能力[(83.550±2.933)％,P=0.016]均显著升高.miR-135b靶向调控HIF-1α.CoCl2或anti-miR-135b会导致低表达SP-1的缺氧H9c2细胞增殖能力显著降低[(48.470±2.831)％比(63.728±4.192)％,P=0.000,0.021],细胞凋亡率[(41.076±1.117)％比(35.935±1.776)％,P=0.000,0.010]和细胞上清液中TNF-α[(6.211±0.408)pg/mL比(5.250±0.325)pg/mL,P=0.019,0.033]、IL-1β[(43.417±2.561)pg/mL比(38.675±1.956)pg/mL,P=0.013,0.021]、IL-6[(110.440±7.446)pg/mL比(108.767±6.589)pg/mL,P=0.026,0.031]和ROS[(1.351±0.073)比(1.327±0.041),P=0.073,0.035]的含量显著升高.结论 SP-1低表达通过miR-135b/HIF-1α轴发挥对缺氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄珊	海南医学院第一附属医院心血管内科	16	55	4.0	7.0
2	杨洋	海南医学院第一附属医院心血管内科	13	18	2.0	3.0
3	孟庆雯	海南医学院第一附属医院心血管内科	9	21	3.0	4.0
4	魏俊萍	海南医学院第一附属医院心血管内科	1	0	0.0	0.0
5	杨珊珊	海南医学院第一附属医院心血管内科	1	0	0.0	0.0