长链非编码RNA Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

• 作者: 刘春华 孙宪昌 张昭强 李龙 陈鹏
• 来源期刊: 中华行为医学与脑科学杂志
• 关键词: 长链非编码RNA Sox2OT 阿尔茨海默病 PI3K/Akt Aβ1-42
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 785-791
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn371468-20200305-01092

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响。方法:选取大鼠嗜铬神经瘤细胞株(PC12)，利用Aβ1-42对PC12细胞进行处理，建立AD的细胞模型。将Aβ1-42诱导前的PC12细胞设为空白组；将Aβ1-42诱导后的PC12细胞分为control组、Sox2OT过表达(p-Sox2OT)组、p-Sox2OT空载体(p-NC)组、抑制Sox2OT表达(si-Sox2OT)组和si-Sox2OT空载体(si-NC)组。使用噻唑蓝(MTT)方法对细胞的增殖活性进行检测；采用流式细胞术对转染后的细胞周期和凋亡率进行检测；采用Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果:MTT结果显示，与空白组(99.67±10.50 )相比，control组(29.33±5.51 )的细胞增殖率显著降低( t＝10.27， P<0.05)。RT-qPCR结果显示，与control组(0.52±0.06)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高( t＝16.93， P<0.05)，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降( t＝15.28， P<0.05)；与p-NC组(0.53±0.12)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高( t＝16.25， P<0.05)；与si-NC组(0.51±0.09)相比，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降( t＝16.93， P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的差异无统计学意义( P>0.05)。此外，p-Sox2OT组细胞的增殖能力(145.00±5.12)显著高于si-Sox2OT组(23.33±4.93)、control组(55.00±5.00)、si-NC组(57.33±8.51)以及p-NC组(56.00±5.57)( t＝29.65，21.78，27.55，21.35，均 P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间细胞增殖率的差异不具有统计学意义( P>0.05)。细胞周期检测实验显示，p-Sox2OT组G1期的细胞数量显著低于control组和p-NC( t＝9.80，8.57；均 P<0.05)，而p-Sox2OT组G2期的细胞数量与control组和p-NC组相比却显著升高( t＝11.02，10.25；均 P<0.05)；si-Sox2OT组G1期的细胞数量显著高于control组和si-NC组( t＝8.22，3.11，均 P<0.05)，而G2期的细胞数量与control组和si-NC组相比却显著下降( t＝6.32，5.33；均 P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞周期差异无统计学意义(均 P>0.05)。在S期中，只有p-Sox2OT组与control组之间的差异有统计学意义( t＝1.84， P<0.05)。p-Sox2OT组细胞凋亡率[(3.66±0.26)%]低于si-Sox2OT组[(14.25±0.80)%]、control组[(8.46±0.44)%]、si-NC组[(8.78±0.44)%]以及p-NC组[(8.40±0.21)%]( t＝21.81，16.27，20.32，21.35，均 P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞凋亡率差异不具有统计学意义( P>0.05)。Western blot结果显示，p-Sox2OT组中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达明显高于p-NC( P<0.05)；与si-NC组相比，si-Sox2OT组PC12细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达显著下降( P<0.05)。 结论:lncRNA Sox2OT可以通过调控PI3K/Akt通路促进Aβ1-42诱导的PC12细胞的增殖，抑制细胞的凋亡。