靶向调控c-SKI的microRNA的筛选及验证

• 作者: 吕忠英 张颖 曹桂秋 李鹏 王娟
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: c-SKI miR-155a-5p miR-17a-5p 双萤光素酶报告系统 心肌纤维化
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 60-66
• 页数: 7页
• 分类号: R54
• 字数: 3657字
• 语种: 中文

摘要

目的 筛选和验证靶向调控c-SKI并与纤维化相关的microRNA(miRNA).方法 生物信息学方法预测并结合文献报道,筛选出靶向c-SKI的候选miRNAs,RT-qPCR检测人心肌成纤维细胞(HCFBs)中候选miRNAs和c-SKI的表达,筛选出抑制作用最显著的miRNA;构建c-SKI-3′-UTR野生型(c-SKI-wt)和突变型(c-SKI-mut)载体,分别与miR-155a-5p/miR-17a-5p的模拟物、抑制剂及对照在人胚肾上皮细胞(HEK293T)中共转染,双萤光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性;接着,分别将miR-155a/miR-17a-5p mimics和inhibitor转染至人心肌成纤维细胞(HCFBs),Western blot检测各组细胞c-SKI的表达.结果 1)经筛选miR-155a-5p和miR-17a-5p对c-SKI的抑制作用最明显(P<0.01);2)与NC组相比,miR-155a-5p/miR-17a-5p mimics组萤光素酶活性均显著下降(P<0.05),miR-155a-5p/miR-17a-5p inhibitor组萤光素酶活性均明显增强(P<0.05);3)与NC组相比,miR-155a-5p/miR-17a-5p mimics组中c-SKI蛋白表达显著下调,miR-155a-5p/miR-17a-5p inhibitor组中c-SKI的表达显著上调(P<0.01).结论 miR-155a-5p和miR-17a-5p可分别靶向结合c-SKI的3′-UTR,在HCFBs中负性调控c-SKI的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹏	新疆医科大学第五附属医院心血管内科	73	334	11.0	14.0
2	张颖	新疆医科大学第五附属医院心血管内科	82	372	11.0	16.0
3	王娟	新疆医科大学第五附属医院心血管内科	67	417	11.0	19.0
4	曹桂秋	新疆医科大学第五附属医院心血管内科	41	164	7.0	10.0
5	吕忠英	新疆医科大学第五附属医院心血管内科	17	28	4.0	5.0