地塞米松对脂多糖诱导人视网膜色素上皮细胞炎症损伤及NLRP3/Caspase-1通路的影响

• 作者: 崔铮 朱冬梅 王媛 靖鹏举
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 地塞米松 脂多糖 人视网膜色素上皮细胞 炎症损伤 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1通路
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 826-830
• 页数: 5页
• 分类号: R774.1
• 语种: 中文

摘要

目的 探究地塞米松(Dex)对脂多糖(LPS)诱导人视网膜色素上皮(HRPE)细胞炎症损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路的影响.方法 体外培养ARPE-19细胞株,MMT法检测不同浓度Dex处理细胞24h、48 h、74 h对LPS诱导ARPE-19细胞存活率的影响,确定Dex最佳处理浓度和时间.ARPE细胞随机分为:正常对照组(NC组)、LPS组(5 mg·L-1 LPS)、Dex组(0.20mol·L-Dex)、Dex+ LPS组(0.20 mol·L-1 Dex+5 mg·L-1 LPS),RT-qPCR检测各组细胞肿瘤坏死因子-仅(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、NLRP3、Caspase-1 mRNA相对表达量,ELISA法测定TNF-α、IL-13、IL-6蛋白表达水平,Western blot检测NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平.结果 同一时间点,与NC组比较,LPS组ARPE-19细胞存活率均显著降低(均为P＜0.05),且随着Dex浓度增加,细胞存活率呈先升高后下降的趋势;0.20 mol·L-1 Dex作用LPS诱导的ARPE-19细胞24h时细胞存活率为(90.77±5.73)％,接近NC组,因此选用0.20 mol·L-Dex作用24 h用于后续实验.NC组与Dex组间TNF-α、IL-1β、IL-6、NL-RP3、Caspase-1 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(均为P＞0.05).与NC组、Dex组比较,LPS组、Dex+ LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6、NLRP3、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高,且Dex+ LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6、NLRP3、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于LPS组(均为P＜0.05).结论 Dex可能通过抑制NLRP3/Caspase-1通路减轻LPS诱导的HRPE炎症损伤.