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摘要:
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEATl调控miR-206对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响和机制.方法 体外培养H9c2心肌细胞,构建心肌细胞缺氧复氧模型.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧复氧诱导后lncRNA NEAT1和miR-206的表达水平.将lncRNA NEAT1小干扰RNA( si-lncRNA NEATl)、miR-206模拟物(miR-206 mimics)分别转染H9c2细胞,缺氧复氧诱导后,检测细胞中丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量以及细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 ( cleaved Caspase-3)和cleaved Caspase-9蛋白表达.利用焚光素酶报告基因实验以及RT-qPCR验证lncRNA NEAT1和miR-206的靶向结合关系.结果 缺氧复氧诱导后H9c2细胞中lncRNA NEAT1的表达显著升高,miR-206的表达显著降低(P<0. 05).转染si-lncRNA NEAT1或miR-206 mimics处理缺氧复氧H9c2细胞,细胞存活率显著升高,MDA、R0S含量以及LDH活性显著降低,cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9蛋白的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0. 05).lncRNA NEAT1靶向miR-206并负调控miR-206表达.抑制miR-206部分逆转沉默lncRNA NEAT1对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化损伤和凋亡的影响(P<0.05).结论 沉默lncRNA NEAT1通过上调miR-206可减轻缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡,进而发挥心肌保护作用.
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文献信息
篇名 lncRNA NEAT1调控miR-206对缺氧复氧大鼠心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响
来源期刊 中国动脉硬化杂志 学科 医学
关键词 缺氧复氧 心肌细胞 氧化应激损伤 细胞凋亡 lncRNA NEAT1 miR-206
年,卷(期) 2020,(12) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 1034-1041
页数 8页 分类号 R5
字数 语种 中文
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中国动脉硬化杂志
月刊
1007-3949
43-1262/R
大16开
湖南省衡阳市南华大学
42-165
1993
chi
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