内质网应激调控二氧化硅诱导的RAW264.7细胞自噬及肿瘤坏死因子-α分泌

• 作者: 周煜 林晓芳 王蕾 胡永斌 覃小峰 陈慧 陈慧萍
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 二氧化硅 巨噬细胞,肺泡 肿瘤坏死因子α 转化生长因子β1 自噬 内质网应激
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 91-95
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2020.02.003

摘要

目的 探讨内质网应激(ERS)在二氧化硅(SiO2)诱导的RAW264.7细胞自噬中的作用及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌的影响.方法 以200 μg/ml SiO2刺激的RAW264.7细胞为体外细胞模型,以SiO2不同处理时间分组,包括0h组(对照组)、6、12、24和48 h组,通过吖啶橙及单丹(磺)酰戊二胺荧光(MDC)染色检测细胞自噬小体的形成.应用实时聚合酶链反应(实时PCR)检测自噬相关分子Beclin1 mRNA表达,蛋白免疫印迹(western blotting)检测自噬相关蛋白LC3 Ⅰ、LC3 Ⅱ与Beclin1的表达;应用实时PCR和western blotting检测ERS特异标记分子BiP的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测RAW 264.7细胞转化生长因子-β1 (TGF-β1)和TNF-α的分泌.以ERS抑制剂4-PBA进行干预试验,包括空白对照组、SiO2组、1 μmol/L 4-PBA+SiO2组、10 μmol/L 4-PBA+SiO2组、20 μmol/L 4-PBA+SiO2组,检测各组LC3 Ⅰ、LC3Ⅱ与Beclin1蛋白的表达及TGF-β1、TNF-α的分泌变化.结果 与对照组比较,SiO2诱导RAW264.7细胞各时间组荧光强度均明显增强,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,SiO2诱导RAW264.7细胞各时间组的Beclin1 mRNA表达均明显增加,LC3 Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达均明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,SiO2诱导RAW264.7细胞6、12、24 h组BiPmRNA和蛋白表达均明显增加,6h达高峰,差异均有统计学意义(P＜0.05);与SiO2组比较,随着4-PBA浓度增加,RAW264.7细胞的LC3-II和Beclin 1蛋白水平逐渐下调,差异均有统计学意义(P＜0.05);与SiO2组比较,1、10、20 μmol/L 4-PBA+SiO2组RAW264.7细胞TNF-α分泌水平明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SiO2诱导的ERS可能参与了RAW264.7细胞自噬以及TNF-α的分泌过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王蕾	中南大学湘雅医院病理科	24	71	5.0	8.0
2	陈慧	中南大学湘雅医学院	32	281	9.0	16.0
3	陈慧萍	中南大学湘雅医院病理科	2	0	0.0	0.0
4	周煜	中南大学湘雅医学院	2	2	1.0	1.0
5	覃小峰	中南大学湘雅医学院	2	0	0.0	0.0
6	林晓芳	中南大学湘雅医学院	2	0	0.0	0.0