荧光定量PCR法测定地特胰岛素原料中酿酒酵母宿主DNA残留量

• 作者: 周朝东 张晶 黄哲甦
• 来源期刊: 现代药物与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 地特胰岛素 酿酒酵母 残留宿主DNA 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1312-1315
• 页数: 4页
• 分类号: R927.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.1674-5515.2020.07.005

摘要

目的 建立检测地特胰岛素原料中宿主DNA残留量的荧光定量核酸扩增(Real-time PCR)方法并进行验证,用于该产品的质量控制.方法 选择酿酒酵母5sRNA作为靶基因设计引物,提取地特胰岛素原料中的残留宿主DNA,采用Real-time PCR SYBRGreen染料法对标准DNA和样品进行测定,绘制标准曲线并分析样品中的DNA残留量.对建立的方法进行方法学验证,并测定3批地特胰岛素原料中的残留宿主DNA.结果 酿酒酵母基因组DNA质量浓度在0.18～180000 ng/mL线性良好(r2=0.9985);回收率均在80.0％～106.3％,检测3批地特胰岛素原料的宿主DNA残留量均低于进口药品注册标准限度.结论 该方法可用于酿酒酵母生产的地特胰岛素原料中残留宿主DNA的定量测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄哲甦		31	67	4.0	7.0
2	周朝东		10	14	3.0	3.0
3	张晶		2	0	0.0	0.0