Sp1基因通过CD59调控T细胞急性淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡

• 作者: 侯丽敏 周伟 李岚 王晖 荀利如 高秋英
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: T细胞急性淋巴细胞白血病 Sp1 CD59 PI3K/AKT/GSK3β信号通路 细胞凋亡 转移
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 肿瘤研究
• 页码范围: 1284-1294
• 页数: 11页
• 分类号: R733.71
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2020.12.002

摘要

目的 探究Sp1和CD59在T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)中的表达模式,以及Sp1和CD59对T-ALL细胞功能的影响.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测了20例T-ALL患者和20名健康受试者的骨髓样本,以及人正常外周血单个核细胞(PBMC)和T-ALL细胞系CCRF-CEM中Sp1和CD59 mRNA表达水平.两种细胞均购自美国典型培养物保藏中心(ATCC).CCRF-CEM细胞分为6组:对照组(未处理的细胞)、si-NC组(转染阴性对照siRNA的细胞)、si-Sp1组(转染靶向Sp1的siRNA的细胞)、pcDNA3.1-NC组(转染阴性pcDNA3.1质粒的细胞)、pcDNA3.1-CD59组(转染过表达CD59的pcDNA3.1质粒的细胞)和si-Sp1+pcDNA3.1-CD59组(同时转染靶向Sp1的siRNA和过表达CD59的pcDNA3.1质粒的细胞).通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定细胞增殖,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用伤口愈合实验检测细胞迁移,通过Transwell实验检测细胞侵袭,采用蛋白质印迹分析(Western blot)检测PI3K/AKT/GSK3β信号通路相关分子的蛋白表达.结果 T-ALL患者骨髓中Sp1和CD59的mRNA表达水平均显著高于健康人(P<0.05).CCRF-CEM细胞中的Sp1和CD59的mRNA表达水平显著高于PBMC(P<0.05).与对照组相比,si-Sp1组CD59 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05).对照组和pcDNA3.1-CD59组中Sp1的mRNA和蛋白表达水平无显著差异(P>0.05).与对照组相比,si-Sp1组细胞活力、迁移和侵袭能力显著降低,而pcDNA3.1-CD59组显著升高(P<0.05);si-Sp1组细胞凋亡率显著升高,而pcDNA3.1-CD59组显著降低(P<0.05);si-Sp1组的p-PI3K、p-AKT和p-GSK3β蛋白表达水平显著降低,而pcDNA3.1-CD59组显著升高(均P<0.05).与pcDNA3.1-CD59组相比,si-Sp1+pcDNA3.1-CD59组的细胞活力、迁移和侵袭能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,p-PI3K、p-AKT和p-GSK3β 蛋白表达水平显著降低(均P<0.05).结论 Sp1和CD59在T-ALL中异常高表达.沉默Sp1通过靶向下调CD59的表达来抑制T-ALL细胞增殖、迁移和侵袭及PI3K/AKT/GSK3β信号通路活化,并促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晖		77	436	10.0	18.0
2	荀利如		12	29	4.0	5.0
3	周伟		5	13	2.0	3.0
4	高秋英		14	20	3.0	3.0
5	侯丽敏		9	13	2.0	3.0
6	李岚		6	2	1.0	1.0