青藤碱对胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响及机制

• 作者: 刘作良 周程继 张肖 李勋 祝晓娟 青泓屹 魏寿江
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 青藤碱 miR-33a-5p 乳酸脱氢酶A SGC-7901
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1350-1356
• 页数: 7页
• 分类号: R965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.09.007

摘要

目的 探究青藤碱(SIN)对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 正常培养人胃正常黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌细胞SGC-7901作对照组(Control),分别用0.5、1.0、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,并设立阳性对照(50 μmol/L塞来昔布),采用CCK-8法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;经在线预测软件分析miR-33a-5p和乳酸脱氢酶A(LDHA)靶向关系,并通过双荧光素酶报告确认;将miR-33a-5p mimics转染SGC-7901细胞,采用RT-qPCR检测miR-33a-5p和LDHA mRNA的表达;重组构建过表达LDHA载体转染SGC-7901细胞,用0.5、1、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况.结果 与Control组相比,SIN可提高SGC-7901细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、E-cadherin及miR-33a-5p的表达,并降低其存活率、侵袭数、迁移率、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin及LDHA mRNA的表达(P＜0.05).LDHA是miR-33a-5p的预测靶点.SIN可上调miR-33a-5p的表达,并下调LDHA mRNA的表达(P＜0.05);与Contorl组相比,过表达LDHA后,细胞SGC-7901的凋亡率下降,其LDHA蛋白表达、存活率、侵袭数和迁移率上升(P＜0.05);SIN处理后,细胞SGC-7901的凋亡率上升,其LDHA蛋白表达、存活率、侵袭数和迁移率下降(P＜0.05);与pcDNA-LDHA组相比,干预SIN后,细胞SGC-7901的凋亡率上升,其存活率、侵袭数和迁移率下降(P＜0.05).结论 SIN可靶向miR-33a-5p下调LDHA水平,介导细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等过程抑制胃癌细胞SGC-7901.