体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞成骨分化的影响

• 作者: 涂小林 谢映春
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨细胞 Notch信号 骨髓基质细胞 成骨分化
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 891-898
• 页数: 8页
• 分类号: R322.71|R329.2|R394-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202001048

摘要

目的 探究体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化的影响.方法 设置Cre重组腺病毒(Ad-Cre)及对照腺病毒GFP(Ad-GFP),分别转染RosaNotch小鼠骨细胞后与野生C57BL/6小鼠BMSCs共培养为Ad-Cre组及Ad-GFP组,设置仅BMSCs为Blank组.碱性磷酸酶染色及生化定量测定碱性磷酸酶(ALP);qPCR检测转染后骨细胞Notch信号靶基因及共培养产物成骨相关标志物、Notch信号配体及成血管相关标志物,茜素红染色检测成骨诱导21 d钙盐沉积水平.结果 Ad-Cre成功激活RosaNotch小鼠骨细胞Notch信号,ALP染色及生化定量结果显示Ad-Cre组ALP表达相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P＜0.05),Ad-GFP组与Blank组间无统计学差异;qPCR结果显示Ad-Cre组共培养产物成骨标志物ALP、核心结合因子al (Runx2)、特异性骨转化因子(Ostrix)及Notch配体Dll4 mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P＜0.05),Jagl mRNA转录水平显著降低(P＜0.05);血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)、血小板内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31/PECAM-1)及内皮粘蛋白(endomucin,EMCN)mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著增高(P＜0.05);茜素红染色结果显示Ad-Cre组在成骨诱导培养基作用21 d后钙盐沉积水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低.结论 体外激活骨细胞Notch信号抑制骨髓基质细胞成骨分化.