高效液相色谱-非特异性同位素稀释质谱联用技术定量分析全血中总血红蛋白含量

• 作者: 冯流星 李红梅 潘梦芸
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 蛋白质定量 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱 同位素稀释 血红蛋白 转铁蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1983-1988
• 页数: 6页
• 分类号: O657.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20200321

摘要

建立了基于同位素稀释(ID)的高效液相色谱(HPLC)-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用技术,通过测量血红蛋白(HGB)中铁(Fe)元素含量实现了全血中总HGB准确定量的策略.该策略包括2种方法,第一种方法为在线HPLC-ID-ICP-MS定量技术:全血中HGB经液相色谱分离后,通过柱后在线添加浓缩54Fe同位素稀释剂的方式,与液相色谱洗脱液经三通混合后进入ICP-MS在线测量54Fe/56Fe的同位素比值,并根据同位素稀释质谱法公式及蛋白中Fe的含量计算HGB的浓度.针对全血样品中存在的其它主要含铁蛋白[如转铁蛋白(Tf)],在实现色谱完全分离的基础上,通过在线优化改变54Fe稀释剂流速实现了HGB和Tf的同时定量.在另一种方法中,先对全血样品进行消解并通过ID-ICP-MS测定其中Fe的总量,然后根据全血样品的HPLC-ICP-MS分析结果,通过计算HGB质谱峰面积占总峰面积的比值从而得到HGB中Fe含量占总Fe含量的比例,实现了其中HGB的准确定量.2种定量方法得到的结果分别为(115.3±2.4)mg/g和(115.5±2.1)mg/g,结果吻合良好,方法的检出限为1.0×10?7 mg/g,方法精密度RSD均<3％.2种方法均经过HGB标准物质IRMM/IFCC-467进行验证,测量结果在标准值不确定度范围之内,可作为临床检验领域HGB分析的参考测量方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红梅		118	648	13.0	21.0
2	冯流星		21	52	4.0	6.0
3	潘梦芸		1	0	0.0	0.0