LncRNA HOTAIR靶向miR-126-5p对IL-1β诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡的影响

• 作者: 冉恩荣 曾瑜 韩雨梅
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 长链非编码RNA HOTAIR miR-126-5p IL-1β 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1810-1815
• 页数: 6页
• 分类号: R319
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.10.009

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA) HOTAIR对人白细胞介素1β(IL-1β)诱导的肾小球系膜细胞HRMC增殖、凋亡的调控机制.方法:将HRMC细胞随机分为NC组(用于IL-1β等量的PBS处理48 h)、IL-1β组(10 ng/mL IL-1β处理48 h)、si-NC+IL-1β组(转染si-NC后再用10 ng/mL IL-1β处理)、si-HOTAIR+IL-1β组(转染si-HOTAIR后用10 ng/mL IL-1β处理)、miR-NC+IL-1β组(转染miR-NC后用10 ng/mL IL-1β处理)、miR-126-5p+IL-1β组(转染miR-126-5pmimics后用10 ng/mL IL-1β处理)、si-HOTAIR+anti-miR-NC+IL-1β组(共转染si-HOTAIR和anti-miR-NC后用10 ng/mL IL-1β处理)、si-HOTAIR+anti-miR-126-5p+IL-1β组(共转染si-HOTAIR和anti-miR-126-5p后用10 ng/mL IL-1β处理);运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测不同处理的HRMC细胞中HOTAIR、miR-126-5p的含量.脂质体法将各个质粒或DNA转染至HRMC.流式细胞术、蛋白质免疫印迹(Westem blotting)、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的凋亡、增殖率和细胞周期蛋白(CyclinD1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase-3)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞中HOTAIR与miR-126-5p的结合力.结果:与NC组相比,IL-1β组HRMC细胞中HOTAIR表达显著升高,miR-126-5p表达显著降低,细胞增殖率显著升高,细胞凋亡率显著降低,CyclinD1蛋白发生上调,Cleaved-caspase-3蛋白发生下调(P＜ 0.05);si-HOTAIR+IL-1β组或miR-126-5p+IL-1β组细胞增殖率显著降低,细胞凋亡率显著升高,CyclinD1蛋白发生下调,Cleaved-caspase-3蛋白发生上调(P＜0.05).HOTAIR与miR-126-5p之间具有靶向关系,并且低表达miR-126-5p可逆转低表达HOTAIR对IL-1β诱导的HRMC细胞增殖、凋亡的影响.结论:LncRNA HOTAIR可通过靶向miR-126-5p参与IL-1β诱导的HRMC细胞的增殖促进和凋亡抑制作用.