miR-451通过靶向ROCK1对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的调控作用

• 作者: 包媛媛 张春莲 方彩云 黄丽 龚豪
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: miR-451 RCOK1 卵巢癌 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1931-1941
• 页数: 11页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.11.001

摘要

目的:探讨miR-451对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的作用及机制.方法:通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测卵巢癌组织及卵巢癌细胞、癌旁组织及正常卵巢上皮细胞中miR-451与Rho的卷曲螺旋激酶1(ROCK1) mRNA的表达;将卵巢癌CaOV-3细胞分为6组:Control组(未转染组)、miR-NC组(用miR-NC无序序列转染)、miR-451 mimic组(用过表达miR-451的模拟物转染)、miR-451 inhibitor组(用抑制miR-451表达的质粒转染)、pc-ROCK1组(用过表达ROCK1的质粒转染)和miR-451 +pc-ROCK1组(miR-451的模拟物和过表达ROCK1的质粒联合转染);通过划痕实验检测细胞迁移能力;通过Transwell法检测细胞侵袭能力,通过蛋白印迹法检测E-钙粘附蛋白(E-carderin)、N-钙粘附蛋白(N-carderin)、细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)、ROCK1蛋白表达水平;通过TargetScan数据库预测miR-451靶基因;通过双荧光素酶报告检测miR-451与ROCK1靶向关系.结果:与癌旁组织相比,在大多数卵巢组织中miR-451表达下调(57/70,81.43％);低表达的miR-451患者卵巢癌肿瘤较大,分化程度较差,多属于FIGO晚期,并存在明显的腹膜转移(P＜0.05).与对照组相比,miR-451 mimic组卵巢癌CaOV-3细胞划痕闭合率明显降低、侵袭细胞数目明显减少、E-cadherin明显上调、N-cadherin和MMP2表达明显下调(P＜0.01),miR-451 inhibitor组和卵巢癌CaOV-3细胞划痕闭合率明显升高、侵袭细胞数目明显增多、E-cadherin明显下调、N-cadherin和MMP2表达明显上调(P＜0.01).miR-451靶向下调ROCK1.共转染pc-ROCK1逆转miR-451 mimic对卵巢癌CaOV-3细胞侵袭和迁移的影响(P＜0.01).结论:miR-451通过靶向下调RCOK1抑制卵巢癌CaOV-3细胞迁移和侵袭能力.