摘要:
目的 观察通窍活血汤灌胃对小鼠颅脑损伤的改善作用,并探讨其机制.方法 60只小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组各20只,模型组和治疗组小鼠采用改良自由落体法建立颅脑损伤模型.建模后6 h时,三组均给予凝血酶、甘露醇尾静脉注射,治疗组同时给予通窍活血汤灌胃.建模后24 h时,使用改良的神经功能缺损评分(mNSS评分)评估各组小鼠神经功能损伤程度.评估后每组取3只小鼠处死,取损伤侧脑组织,分别称取湿重和干重后,计算小鼠脑组织水含量.评估后每组取3只小鼠处死,取损伤侧脑组织,TUNEL法检测小鼠脑组织细胞凋亡率,PCR法检测小鼠脑组织线粒体DNA(mtDNA),Western Blotting法检测小鼠脑组织中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、细胞色素C氧化酶Ⅳ亚型(COXⅣ)、切割活化的半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3)、凋亡抑制基因Bcl-2蛋白.结果 假手术组、模型组、治疗组mNSS评分分别为(2.00±0.47)、(15.00±0.47)、(6.00±0.94)分,组间相比,P均<0.05.假手术组、模型组、治疗组脑组织水含量分别为74.4%±0.36%、84.2% ±0.64%和79.5% ±0.70%,组间相比,P均<0.05.假手术组、模型组、治疗组细胞凋亡率分别为9.60% ±1.87%、35.70% ±6.61%和21.50% ±5.19%,组间相比,P均<0.05.假手术组、模型组、治疗组脑组织mtDNA相对表达量分别为1.028±0.233、0.040±0.003和0.510±0.201,组间相比,P均<0.05.与假手术组相比,模型组和治疗组LC3Ⅱ/Ⅰ、MnSOD、COXⅣ、Bcl-2蛋白相对表达量均显著降低,p62、cleaved Caspase-3蛋白相对表达量均显著升高;与模型组相比,治疗组LC3Ⅱ/Ⅰ、MnSOD、COXⅣ、Bcl-2蛋白相对表达量均显著升高,p62、cleaved Caspase-3蛋白相对表达量均显著降低.结论 通窍活血汤灌胃可改善小鼠颅脑损伤情况,其作用机制可能与激活线粒体自噬、抑制细胞凋亡有关.