基于茎环引物探针法定量检测乙型肝炎病毒miR-3的方法学建立

• 作者: 崔毅峙 王通 陈希
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 微小RNA-3 RT-qPCR 引物探针 精准定量
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1721-1728
• 页数: 8页
• 分类号: R512.6+2|R33-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.09.027

摘要

目的:本研究拟通过广泛筛选特异性引物探针组,建立一套乙型肝炎病毒(HBV)微小RNA-3(miR-3)的绝对定量PCR检测方法.方法:基于茎环引物RT-qPCR方法原理,设计茎环引物进行逆转录,结合SYBR Green法qPCR进行特异性初筛,选择特异性较佳的引物组,再结合TaqMan MBG探针,确定最佳的引物探针组,实现对HBV miR-3的定量检测.结果:共设计和测试了25套茎环引物组,利用基于SYBR Green的RT-qPCR方法,筛选出6套具有良好特异性的引物组,并进一步针对这些引物组设计和测试了相应的探针,获得了可精准定量HBV miR-3的引物探针组.测试结果表明,该引物探针组不但保证了高特异性,而且定量线性范围达到每个反应102～108拷贝,其扩增效率约为88％.结论:本研究确立了一套可用于绝对定量检测HBV miR-3的特异性引物探针组.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王通		60	552	14.0	21.0
2	陈希		4	9	2.0	3.0
3	崔毅峙		4	5	1.0	2.0