人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的建立

• 作者: 孙彬裕 孙晶 孙楠 曲守方 李丽莉 胡泽斌 高飞 黄杰
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: 人类白细胞抗原 B27 SBT测序法 国家参考品 协作标定
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1285-1288,1293
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 建立人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品.方法 采集HLA?B27阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系.提取细胞基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证.用4家协作标定单位的HLA?B27核酸检测试剂,采用荧光PCR法、PCR?SSP法、SBT测序法对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶(在-20℃和25℃之间反复冻融3次)稳定性和均匀性研究.结果 成功制备HLA?B27国家参考品,包含3例HLA?B27阳性DNA样本和7例HLA?B27阴性DNA样本.经荧光PCR法、PCR?SSP法、SBT测序法协作标定,参考品定值准确.参考品均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定.结论 人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于人类白细胞抗原B27核酸检测试剂盒的性能评价.