TRIM31过表达改善脂多糖诱导下神经细胞的炎症损伤

• 作者: 周佳 梁日初 王涛 罗炜
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: TRIM31 NLRP3炎症小体 脂多糖 神经损伤
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 1935-1940
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.16.004

摘要

目的:探讨E3泛素连接酶31 (TRIM31)对LPS诱导PC12细胞炎症性损伤的保护作用和机制.方法:用不同浓度LPS处理PC12细胞24h,MTT法检测细胞增殖活性,Western blot检测LPS最佳浓度处理后PC12细胞TRIM蛋白表达水平.将TRIM31过表达质粒(pcDNA3.1-TRIM31)及其阴性对照质粒(pcDNA3.1-NC)转染至PC12细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞TRIM31 mRNA和蛋白表达水平.PC12细胞分为对照组(Control)、LPS组、LPS+NC组和LPS+TRIM31组,分组干预后,ELISA检测细胞上清IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光检测NLRP3蛋白表达,qRT-PCR检测NLRP3、caspase-1 mRNA表达,Western blot检测NLRP3、caspase-1、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:LPS剂量增加,PC12细胞增殖活性逐渐降低(P＜0.05),LPS处理可降低PC12细胞TRIM31蛋白表达水平(P＜0.01),TRIM31过表达,PC12细胞TRIM31 mRNA和蛋白表达水平显著提高(P＜0.05).与Control组相比,LPS组细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量、细胞凋亡率及细胞Cleaved-caspase-3和Bax蛋白水平显著提高(P＜0.05),Bcl-2和TRIM31蛋白水平显著降低(P＜0.05),NLRP3蛋白荧光强度及NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白表达水平显著提高(P＜0.05);与LPS组相比,LPS+TRIM31组细胞上清中IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量、细胞凋亡率及细胞Cleaved-caspase-3和Bax蛋白水平显著降低(P＜0.05),Bcl-2蛋白水平显著提高(P＜0.05),NLRP3荧光强度及NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论:过表达TRIM31能通过抑制NLRP3炎症小体活化,改善LPS诱导的PC12细胞炎症损伤.