miR-382-3p靶向RASA1基因调控骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡

• 作者: GILDAS ALOGO YING 任路通 梁东星 焦建宝 王一凡 王康
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: miR-382-3p RASA1 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2440-2446
• 页数: 7页
• 分类号: R33|R684.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2020.13.008

摘要

目的:探讨miR-382-3p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法:用100 ng/mL的脂多糖(LPS)处理软骨细胞,记为LPS组,以正常培养的软骨细胞作为正常对照(NC)组.miR-NC、miR-382-3p、anti-miR-NC、anti-miR-382-3p转染至软骨细胞中,记为miR-NC组、miR-382-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-382-3p组;将miR-NC、miR-382-3p、si-NC、si-RASA1转染至软骨细胞后再用100 ng/mL的LPS处理,记为miR-NC+LPS组、miR-382-3p+LPS组、si-NC+LPS组、si-RASA1+LPS组;将miR-382-3p分别与pcDNA-NC、pcDNA-RASA1共转染至软骨细胞后再用100 ng/mL的LPS处理,记为miR-382-3p+pcD-NA-NC+LPS组、miR-382-3p+pcDNA-RASA1 +LPS组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-382-3p和Ras p21蛋白活化因子1 (RASA1)mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测RASA1、细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (Cleaved-caspase-3)蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光素酶报告实验检测miR-382-3p和RASA1的靶向关系.结果:LPS诱导的软骨细胞中miR-382-3p表达水平显著降低,RASA1表达水平显著升高,CyclinD1表达水平显著降低,Cleaved-caspase-3表达水平显著升高,细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).过表达miR-382-3p和敲减RASA1,LPS诱导的软骨细胞中CyclinD1表达水平显著升高,Cleaved-caspase-3表达水平显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低(P＜0.05).miR-382-3p靶向调控RASA1,高表达RASA1部分逆转了miR-382-3p高表达对LPS处理的软骨细胞增殖和凋亡的影响.结论:过表达miR-382-3p促进软骨细胞增殖,抑制LPS诱导的软骨细胞凋亡,其机制可能与RASA1有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王康	河北省儿童医院骨外科	6	1	1.0	1.0
2	焦建宝	河北大学附属医院骨科	32	165	6.0	12.0
3	王一凡	河北大学附属医院骨科	3	2	1.0	1.0
4	GILDAS ALOGO YING	河北医科大学附属医院骨科	1	0	0.0	0.0
5	梁东星	保定市骨科医院脊柱外科	1	0	0.0	0.0
6	任路通	河北大学附属医院骨科	1	0	0.0	0.0