猪附红细胞体重组酶介导等温扩增技术(RAA)荧光检测方法的建立

• 作者: 杜秋明 郑秀红 樊晓旭 赵永刚 乔启波 南文龙 许龙春 吴晓东
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪附红细胞体 重组酶介导等温扩增 α-烯醇化酶基因
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 2181-2185
• 页数: 5页
• 分类号: S852.64|R535
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.11.17

摘要

为建立一种准确、快速的猪附红细胞体检测方法,根据猪附红细胞体α-烯醇化酶基因保守序列设计特异性引物和探针,经过筛选优化反应条件,建立了重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法.结果显示,建立的方法在39℃恒温条件下20 min内即可特异性地检出猪附红细胞体,与猪肺炎支原体、猪链球菌、猪大肠杆菌、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、非洲猪瘟病毒、健康猪血液无交叉反应,方法的最低检出限为1 copy/μL.用该方法对15份临床样本进行检测,结果阳性率为60％,与荧光定量PCR方法检测结果一致.本研究建立的猪附红细胞体荧光RAA检测方法具有较好的敏感性和特异性,操作简便可应用于猪附红细胞体病的临床快速检测.