活化蛋白C通过靶向VLA-3-中性粒细胞亚群来减轻结核杆菌诱导的人气道上皮细胞炎症反应线粒体能量代谢障碍

• 作者: 吴海明 王岗玲 陈焰
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 活化蛋白C 整联蛋白VLA-3 细胞凋亡 线粒体功能障碍
• 年，卷（期）: 2020,（23）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3217-3221
• 页数: 5页
• 分类号: R512.91
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2020.23.010

摘要

目的 探究活化蛋白C通过靶向VLA-3-中性粒细胞亚群来减轻结核杆菌诱导的人气道上皮细胞炎症反应线粒体能量代谢障碍的机制.方法 人支气管上皮BEAS-2B细胞分为3组:BEAS-2B组(正常培养的细胞系),结核杆菌诱导组(用50个细菌/细胞的结合杆菌感染BEAS-2B细胞培养物),BEAS-2B转染组(携带活化蛋白C的慢病毒载体与BEAS-2B进行细胞转染).通过可溶性整联蛋白结合测定活化蛋白C与VLA-3的结合度;逆转录定量PCR(RT-qPCR)实时分析IL-6、IL-8、MCP-1的mRNA表达;荧光探针JC-1评估线粒体功能;通过Biosciences测量线粒体膜电位;ELISA和TUNEL鉴定细胞凋亡及活力情况.结果 VLA-3较VLA-3和αVβ3结合程度升高(P<0.05).结核杆菌诱导组较BEAS-2B组IL-6、IL-8、MCP-1 mRNA表达升高(P<0.05),BEAS-2B转染组较结核杆菌诱导组IL-6、IL-8、MCP-1mRNA表达降低(P<0.05).BEAS-2B组较结核杆菌诱导组线粒体复合物Ⅰ、线粒体复合物Ⅳ活性升高(P<0.05),结核杆菌诱导组较BEAS-2B转染组线粒体复合物Ⅰ、线粒体复合物Ⅳ活性降低(P<0.05).BEAS-2B组较结核杆菌诱导组膜电位升高(P<0.05),结核杆菌诱导组较BEAS-2B转染组膜电位降低(P<0.05).BEAS-2B组较结核杆菌诱导组细胞凋亡率降低(P<0.05),结核杆菌诱导组较BEAS-2B转染组细胞凋亡率升高(P<0.05).BEAS-2B组较结核杆菌诱导组细胞活力升高(P<0.05),结核杆菌诱导组较BEAS-2B转染组细胞细胞活力降低(P<0.05).结论 活化蛋白C对整联蛋白VLA3有更强的亲和力,可靶向作用VLA3中性粒细胞亚群降低人气道上皮细胞的炎症反应,提高线粒体复合物Ⅰ、复合物Ⅳ活性,有效抑制结合杆菌诱导的细胞线粒体膜电位下降.