miR-148a靶向Wnt1通路对结直肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

• 作者: 吉祖进 庹磊 杨勇 蒋学军 雷新益
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-148a 结直肠癌 Wnt1通路 细胞迁移 细胞侵袭 N-钙黏蛋白 基质金属蛋白酶2
• 年，卷（期）: 2020,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2020.26.006

摘要

目的 观察微小RNA-148a(miR-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与Wnt1信号通路的关系.方法 取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用qRT-PCR法检测Wnt1 mRNA、miR-148a表达.取HCT116细胞,分为Control组、miR-148a mimic组、miR-148a NC组.转染后48 h,用Transwell法检测HCT116细胞侵袭、迁移情况;通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞miR-148a、Wnt1 mRNA表达;Western blotting法检测各组细胞Wnt1蛋白及通路蛋白相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、侵袭和迁移相关蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a与Wnt1的靶向关系.结果 与FHC细胞相比,HCT116、SW620细胞中Wnt1 mRNA表达升高,miR-148a表达降低(P均<0.05);HCT116与SW620细胞相比差异无统计学意义(P>0.05).与Control组和miR-148a NC组相比,miR-148a mimic组Wnt1 mRNA表达水平、细胞侵袭、迁移能力及Wnt1、β-catenin、MMP-2、N-cadherin蛋白均表达降低,miR-148a表达水平升高(P均<0.05);Control组与miR-148a NC组相比,上述指标差异均无统计学意义(P均>0.05).双荧光素酶报告基因检测显示,与miR-148a NC+Wnt1-3′UTR-WT组比较,miR-148a mimic+Wnt1-3′UTR-WT组荧光素酶活性降低(P<0.05).结论 miR-148a能够靶向抑制Wnt1/β-catenin通路激活,降低N-cadherin、MMP-2蛋白表达,从而抑制CRC细胞的侵袭、迁移能力.