p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

• 作者: 夏豪 徐昌武 江洪 邱立强
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: p300/CBP相关因子 血管平滑肌细胞 增殖 脂多糖 丝裂原活化蛋白激酶p38
• 年，卷（期）: 2020,（17）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 2777-2782
• 页数: 6页
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.12102/j.issn.1672-1349.2020.17.006

摘要

目的 探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及机制.方法 组织块贴壁法获取大鼠原代VSMCs,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMCs抑制PCAF表达.选择1μg/mL的脂多糖(LPS)作为VSMCs增殖诱导剂.将实验分为6组:对照组(A组)、对照组+1μg/mL脂多糖刺激组(B组)、Ad-GFP腺病毒转染组(C组)、Ad-GFP腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(D组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染组(E组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(F组),使用CCK-8和流式细胞周期检测细胞增殖情况,各组中PCAF表达采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测,蛋白免疫印迹法检测各组丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达水平.结果 1μg/mL脂多糖明显促进VSMCs增殖;同时,下调PCAF表达后,VSMCs增殖活性明显降低(P<0.05).流式细胞周期检测结果显示,脂多糖可促进VSMCs由S期向G2期转化,而下调PCAF后可明显抑制脂多糖的作用(P<0.05).同时,脂多糖诱导后VSMCs中PCAF mRNA表达水平明显增强;转染Ad-PCAF RNAi腺病毒后可明显降低VSMCs内PCAF mRNA的表达水平(P<0.05).此外,脂多糖诱导后VSMCs中p-p38 MAPK、p-AKT表达水平均明显升高(P<0.05);而下调PCAF表达后,p-p38 MAPK、p-AKT表达均明显降低(P<0.05).结论 下调PCAF的表达对VSMCs增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制细胞内p-p38 MAPK、p-AKT表达有关.