β-蜕皮甾酮促进小鼠前成骨细胞体外增殖及诱导成骨分化

• 作者: 严才平 易源缘 李毓灵 蒋科 邓长弓 陈路 陈骞
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: β-蜕皮甾酮 MC3T3-E1细胞 成骨分化 碱性磷酸酶 Ⅰ型胶原蛋白 骨桥蛋白 骨钙蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（29）
• 所属期刊栏目: 骨组织构建
• 页码范围: 4605-4612
• 页数: 8页
• 分类号: R446|R496|R318
• 字数: 9507字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2781

摘要

背景:β-蜕皮甾酮作为“植物类雌激素”不仅具有刺激蛋白质合成,促进碳水化合物和脂质代谢,缓解高血糖、高脂血症,以及保护内皮细胞免于凋亡并诱导其增殖的多种生物活性,而且有学者报道其在治疗骨质疏松症、骨折和其他骨骼炎症性疾病方面也有着重要的作用.目的:观察β-蜕皮甾酮对小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1细胞)体外增殖的影响,以及在安全剂量下,β-蜕皮甾酮是否对该细胞具有诱导成骨分化的作用.方法:取第4代MC3T3-E1细胞在成骨诱导分化培养基中培养7,10,14,21,28 d后,检测细胞不同时间段成骨分化蛋白(碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白、骨桥蛋白以及钙化结节)的表达量,以鉴定该细胞是否具有成骨分化的能力;然后将MC3T3-E1细胞接种于含不同终浓度β-蜕皮甾酮(0.01,0.1,1,10,100 μmol/L)的诱导培养基中,分别于第1,2,3,4,5,6,7天利用CCK8法检测细胞的增殖活性;最后设置对照组(普通诱导培养基组)和实验组(普通诱导培养基+β-蜕皮甾酮),在相同条件下进行培养,并测定不同时间段各组细胞成骨标志蛋白的表达量.结果 与结论:①MC3T3-E1细胞在成骨诱导培养基刺激下,第1 0天碱性磷酸酶染色以及Ⅰ型胶原蛋白荧光染色表达较高,同时碱性磷酸酶活性检测也验证了这一结果(P＜ 0.05);诱导培养第14天骨桥蛋白免疫细胞化学染色也有明显表达;茜红素染色显示成骨诱导后的细胞较对照组结节数量明显增加,第28天比第21天的钙结节形成数目更多、直径更大、颜色更深;②CCK8法测得β-蜕皮甾酮对MC3T3-E1细胞作用5d后增殖活性达到最佳,促增殖活性最佳剂量为0.01 U mol/L、0.1 μmol/L,2种浓度之间差异无显著性意义(P＞0.05);③实验组细胞经β-蜕皮甾酮诱导培养第10天较对照组细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白表达更高;第14天实验组细胞内骨桥蛋白、骨钙素表达更高;第28天2组钙结节染色无明显差异;④结果说明,β-蜕皮甾酮能促进MC3T3-E1细胞体外增殖,且在安全剂量下能提高MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋科	川北医学院附属医院骨科	25	40	4.0	4.0
2	陈路	川北医学院附属医院骨科	56	166	7.0	10.0
3	邓长弓	川北医学院附属医院骨科	6	23	3.0	4.0
4	陈骞	川北医学院附属医院骨科	12	6	1.0	2.0
5	李毓灵	川北医学院附属医院骨科	9	6	1.0	2.0
6	严才平	川北医学院附属医院骨科	2	0	0.0	0.0
7	易源缘	川北医学院附属医院神经外科	1	0	0.0	0.0