小鼠鼻黏膜上皮细胞的原代培养和鉴定

• 作者: 崔沐 常换换 王洁
• 来源期刊: 临床医学研究与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻黏上皮细胞 细胞培养 抗细胞角蛋白18
• 年，卷（期）: 2020,（35）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.19347/j.cnki.2096-1413.202035001

摘要

目的 探讨酶消化分离法原代培养小鼠鼻黏膜上皮细胞的实验步骤和技术要点,提高原代培养成功率,为后续实验提供良好的培养模型.方法 小鼠鼻黏膜组织块中加入约组织块5倍体积的0.1％Ⅰ型胶原酶并混合均匀,后置于37℃孵箱中孵育10 min,加入适量FBS终止消化反应.吸除酶液后,继续加入等量的0.25％胰蛋白酶并混合均匀,后置于37℃孵箱中孵育2 h,加入适量FBS终止消化反应.200目细胞过滤筛过滤细胞液,过滤液移置离心管,1000 r/min离心10 min弃上清.沉淀液中加入HBSS漂洗1次,1000 r/min离心5 min弃上清,余细胞加入含血清的DMEM/F12培养基中混合均匀.培养皿置于37℃、5％CO2、95％O2培养箱中,2～3 d换液.倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况,免疫荧光鉴定细胞性质及纯度.结果 原代培养的鼻黏膜上皮细胞第7天可见,第14天大约可以长满培养皿的50％,培养第21天可以长满培养皿;鼻黏膜上皮细胞边缘清晰,数量大,活性好,可供下一步实验研究应用;CK18鉴定为上皮源性细胞,鼻黏膜上皮细胞纯度高达90％.结论 本培养方法简单,鼻黏膜上皮细胞增殖好、纯度高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洁		18	195	4.0	13.0
2	常换换		2	1	1.0	1.0
3	崔沐		2	0	0.0	0.0