LPS通过上调BMP4促进猪主动脉瓣膜间质细胞成骨样分化

• 作者: 朱梦颖 施琼 安利钦 刘艳 翁亚光
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 钙化性主动脉瓣膜病 瓣膜间质细胞 LPS BMP4 成骨样分化
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文|RESEARCH PAPERS
• 页码范围: 284-292
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2021.02.0002

摘要

该文主要探究了LPS通过上调骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)促进猪主动脉瓣膜间质细胞(valve interstitial cells,VICs)成骨样分化的作用及机制,为钙化性主动脉瓣膜病(calcific aortic valve disease,CAVD)的干预及治疗提供理论依据.采用免疫组化法检测非CAVD组和CAVD组瓣膜组织中Runx2和BMP4的表达,Western blot检测Runx2和BMP4的蛋白表达;采用胶原酶(Ⅰ型)消化瓣膜后分离猪VICs,用免疫荧光染色进行表型鉴定;采用LPS和重组人BMP4腺病毒处理VICs;用ALP染色、茜素红S染色、qRT-PCR和Western blot法检测细胞的早期和晚期成骨能力、Smad1/5/8和ERK1/2的磷酸化水平.结果显示,BMP4和Runx2蛋白在CAVD组中的表达水平明显高于non-CAVD组.原代猪VICs分离成功,其中α-SMA和Vimentin呈阳性,CD31呈阴性.LPS可使VICs ALP活性增强、钙盐沉积增多、钙化指标上升和BMP4增加;BMP4可使VICs ALP活性增强、钙盐沉积增多、钙化指标上升,且使Smad1/5/8和EKR1/2的磷酸化水平升高.提示LPS可以上调BMP4的表达进而促进VICs的成骨样分化,Smad1/5/8与ERK1/2信号通路可能在该过程中发挥重要作用.