胆固醇在高脂高胆固醇诱导非酒精性脂肪性肝炎发生发展过程中的动态作用

• 作者: 胡鑫丽 张文慧 王瑞君 王博文 陈星旭 宋维芳
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆固醇 非酒精性脂肪性肝炎 固醇调节元件结合蛋白-2 3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶 低密度脂蛋白受体
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 10-19
• 页数: 10页
• 分类号: R575.1
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨胆固醇在高脂高胆固醇诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)发生发展过程中的动态作用.方法 将SD 大鼠随机分为CON 组(正常饮食)、HFCO 组(20％脂肪)、HFC1 组(20％脂肪+1％胆固醇)、HFC2组(20％脂肪+2％胆固醇)及HFC5 组(20％脂肪+5％胆固醇).饲喂第4、6、8 及12 周末,采血并取肝脏组织;采用油酸(oleic acid,OA)及OA+低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)诱导人肝脏正常细胞(HL-7702)5 d 后,构建NASH 模型,同时以RPMI1640 培养基(含10％FBS)为对照组.分别检测大鼠血浆及HL-7702 细胞培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的含量,大鼠肝脏组织及HL-7702 细胞中总胆固醇(total cholesterol,TC)及甘油三酯(triglyceride,TG)的含量;HE 及Masson 染色观察肝脏组织病理改变;油红0 及菲律宾菌素染色观察HL-7702 细胞内脂滴及胆固醇含量;Western blot 法检测活性n-固醇调节元件结合蛋白-2(n-sterol regulatory element binding protein 2,n-SREBP-2)、低密度脂蛋白受体(low-density lipoproteins receptors,LDLR)及3-轻基3-甲基戊二酰辅酶 A 还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGCR)的蛋白表达水平.结果 动物水平:12周末,与CON 组比较,HFC2组、HFC5 组血浆中ALT、AST及肝脏组织中TC、TG 含量均显著升高(P均＜0.05),肝细胞脂肪变性、气球样变性及纤维化病变明显,HFC2 组、HFC5 组大鼠NASH 诱导成功;经Western blot 分析,4、6及8 周末,HFC2 组、HFC5 组较CON 组LDLR 蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05),12周末,HFC5 组较CON 组LDLR 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);4、6 及8 周末,各组n-SREBP-2 蛋白表达水平与CON 组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),12 周末,HFC2 组、HFC5 组较CON 组n-SREBP-2 蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05);4、6 及12 周末各组HMGCR 蛋白表达水平与CON 组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),8 周末,HFC5 组较CON 组HMGCR 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).细胞水平:OA+LDL-C 组较对照组及OA组细胞内胆固醇含量、n-SREBP-2及HMGCR蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05);OA组及OA+LDL-C组较对照组LDLR 蛋白表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 胆固醇摄入量和摄入时间的长短与NASH 肝损伤呈正相关;胆固醇可诱导肝细胞高表达LDLR,促使胆固醇进入肝脏增加,抑制HMGCR 调控的内源性胆固醇合成;随着肝内胆固醇堆积增多,肝细胞LDLR 表达减少,使肝内胆固醇相对不足,反馈性调节n-SREBP-2 及HMGCR表达升高,打破肝脏胆固醇代谢稳态,促进了 NASH 的发生发展.