聚合酶链式反应和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法鉴定克罗诺杆菌

• 作者: 甘辛 王晓菲 闫韶飞 胡豫杰 董银苹 李凤琴
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 关键词: 克罗诺杆菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 聚合酶链式反应 快速鉴定方法
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法|Experimental Technique and Method
• 页码范围: 144-148
• 页数: 5页
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2021.02.004

摘要

目的 采用聚合酶链式反应(PCR)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术快速鉴定克罗诺杆菌的方法,实现对该菌显色培养基上生长的可疑菌落高通量、低成本初筛.方法 通过内转录间隔区(its)基因设计针对克罗诺杆菌的属特异性引物,以7株参考菌株为对照,对2013年国家食品安全污染物监测网上报、初步鉴定为克罗诺杆菌的214株菌株进行复核鉴定.同时随机挑选其中84株菌,采用MALDI-TOF-MS技术和VITEK革兰阴性细菌鉴定卡鉴定.结果 7株参考菌株的PCR结果与对应大小一致,214株待测菌株PCR结果均为阳性.84株菌MALDI-TOF-MS和VITEK鉴定的结果均为克罗诺杆菌,符合率为100％.结论 PCR和MALDI-TOF-MS技术具有高通量、低成本、耗时短等优势,可以实现大量可疑菌落的初筛,为我国克罗诺杆菌的监测和防控提供技术支持.