柚皮素对人角膜上皮细胞毒性的实验研究

• 作者: 李豪亮 朱然 张希熹 梁舒
• 来源期刊: 中华眼科医学杂志（电子版）
• 关键词: 人角膜上皮细胞 柚皮素 二甲基亚砜 毒性
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-2007.2021.01.007

摘要

目的 探讨柚皮素(Nar)对人角膜上皮细胞(HCECs)的毒性.方法 对购于青旗上海生物技术发展有限公司的HCECs进行细胞毒性实验和划痕实验.应用四氮唑盐比色分析法检测二甲基亚砜(DMSO)溶剂和Nar对HCECs细胞存活率的影响,采用Graphpad Prism8.0软件绘制细胞存活率曲线并计算半抑制浓度(IC50).应用划痕实验观察不同浓度Nar对HCECs迁移的影响,采用ImageJ软件计算细胞的愈合率.吸光度值、存活率及愈合率数值符合正态分布,均采用均数±标准差表示.不同浓度的DMSO溶剂和Nar溶液对HCECs 24 h、48 h及72 h存活率的比较;不同浓度Nar对HCECs 6 h、12 h及24 h划痕愈合率的比较,均采用独立样本t检验.结果 体积百分比为0.04％、0.08％及0.16％的DMSO处理HCECs 24 h,其存活率分别为(94.57±0.83)％、(93.59±1.17)％及(91.43±1.47)％.经t检验,各浓度DMSO处理HCECs 24 h,其存活率与DMEM(dulbecco's modified eagle medium)组比较的差异均有统计学意义(t=3.436,3.882,4.960;P<0.05).体积百分比为0.08％和0.16％的DMSO处理HCECs 48 h,其存活率分别为(94.43±0.38)％和(93.16±0.66)％.经t检验,各浓度DMSO处理HCECs 48 h,其与DMEM组比较存活率的差异均有统计学意义(t=2.953,3.573;P<0.05).体积百分比为0.02％、0.04％、0.08％及0.16％的DMSO处理HCECs 72 h,其存活率分别为(96.28±0.29)％、(95.30±0.25)％、(94.65±0.82)％及(93.73±1.18)％.经t检验,各浓度DMSO处理HCECs 72 h,其与DMEM组比较存活率的差异均有统计学意义(t=3.756,4.763,4.929,5.263;P<0.05).200μM、400μM及800μMNar溶液处理HCECs 48 h,其存活率分别为(60.17±0.46)％、(47.55±0.91)％及(29.19±1.25)％;72 h的存活率分别为(60.02±6.20)％、(31.20±1.96)％及(22.96±2.69)％.经t检验,各浓度Nar处理HCECs 48 h和72 h,其与24 h比较存活率的差异均有统计学意义(t=12.903,6.675,11.215,5.377,12.696,11.972;P<0.05).25μM、400μM及800μM Nar溶液处理HCECs 72 h,其存活率分别为(89.41±1.38)％、(31.20±1.96)％及(22.96±2.69)％.经t检验,各浓度Nar溶液处理HCECs 72 h,其与48 h比较存活率的差异均有统计学意义(t=4.442,13.119,3.631;P<0.05).Nar溶液对HCECs 24 h、48 h及72 h的IC50分别为690.8μM、343.4μM及237.7μM;IC5095％可信区间分别为(574.1～845.5)、(259.2～734.3)及(231.1～266.7).HCECs在0、100μM、200μM及400μM Nar溶液中HCECs 6 h的划痕愈合率分别为(18.04±1.61)％、(16.91±1.56)％、(16.63±2.12)％及(12.20±2.06)％.划痕愈合的时间越长,HCECs的愈合率越高.细胞在100μM Nar溶液浓度中各时间段的划痕愈合率与DMEM组比较的差异均无统计学意义(t=0.872,1.074,1.620;P>0.05);400μMNar溶液各时间段的划痕愈合率与DMEM组比较的差异均有统计学意义(t=3.863,9.869,27.194;P<0.05);200μMNar溶液处理HCECs 12 h和24 h,其划痕愈合率与DMEM组比较的差异均有统计学意义(t=5.714,9.119;P<0.05).结论 Nar可降低HCECs存活率并抑制HCECs迁移愈合率,对HCECs具有毒性.