大豆转录因子GmMYB52的克隆、表达及结合功能分析

• 作者: 许玲 王元琮 何晓兰 黄益洪 徐照龙 邵宏波 张大勇
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 大豆 GmMYB52 表达分析 转录激活功能 结合功能
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1458-1467
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2017.01458

摘要

MYB类转录因子在植物的生长发育和逆境响应中有重要的调控作用。依据课题组前期获得的盐胁迫相关的数字表达谱(DGEP)数据，获得盐胁迫响应显著上调基因GmMYB52，利用RT-PCR方法从栽培大豆(Williams 82)中克隆该基因片段，并与已公布的Williams 82基因组数据库序列比对，该基因与GmMYB52序列一致。生物信息学分析表明，GmMYB52编码区(CDS)全长1083 bp，编码360个氨基酸。其编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征，其距N端110~160氨基酸残基处有MYB结构域; 系统进化树分析表明，该基因编码的蛋白与GmMYB62、拟南芥AtMYBSt1、苜蓿MtMYB52、水稻OsMYBS3及木豆CcMYB-like protein J的亲缘关系最近; 实时荧光定量PCR结果表明，大豆根部GmMYB52的转录水平受外界非生物逆境的调控，用脱落酸(ABA)和低温(4℃)处理后12 h明显上调，用氯化钠和PEG处理0.5~24.0 h后检测到GmMYB52的转录水平在50%~600%区间内呈现出先上调后下调再上调的趋势。GmMYB52为组成型表达，在大豆的幼苗期和开花期表达较多，在成熟期表达相对较低。GmMYB52在茎叶与开花期的花中表达较强，在根的表达较弱，而在成熟期的豆荚中几乎不表达。亚细胞定位的结果表明，GmMYB52定位于细胞核，符合典型转录因子的定位特征。酵母杂交系统检测表明，GmMYB52具有转录激活特征，并且能够与MYB相关顺式作用元件基序相结合。本研究结果表明，GmMYB52编码典型的MYB转录因子，具有转录激活活性及DNA结合活性，在大豆中的表达可能与大豆的非生物胁迫和ABA信号转导途径有关，推测其可能参与了大豆对非生物胁迫的响应。